[发明专利]一种靶向肿瘤多种KRAS突变抗原表位的细胞毒性T淋巴细胞的制备方法在审
申请号: | 201711429033.8 | 申请日: | 2017-12-26 |
公开(公告)号: | CN109957582A | 公开(公告)日: | 2019-07-02 |
发明(设计)人: | 李晨蔚;刘平磊 | 申请(专利权)人: | 上海尚泰生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N5/10;A61P35/00 |
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地址: | 201203 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及靶向多种KRAS突变抗原表位的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的制备方法。本发明方法将7个主要KRAS突变抗原表位序列经串联组合而成的新的人工抗原编码序列,克隆到慢病毒表达载体,转染DC,刺激激活CD8+T细胞的增殖和分化,使得最终制备得到的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)具有靶向7个主要KRAS突变抗原表位的特异性。本发明制备的KRAS突变抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL),具有靶向特异性强、无副作用和不易引起免疫逃逸等优点,在KRAS突变肿瘤的治疗中具有极大的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 突变抗原 制备 细胞毒性 靶向 表位 特异性细胞毒性T淋巴细胞 慢病毒表达载体 靶向肿瘤 编码序列 表位序列 串联组合 人工抗原 特异性强 转染 增殖 突变 克隆 肿瘤 激活 分化 刺激 治疗 应用 | ||
【主权项】:
1.一种靶向肿瘤多种KRAS突变抗原表位的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的制备方法,步骤包括:a)携带7个串联KRAS突变抗原表位序列的慢病毒表达载体的构建;b)步骤a)所述慢病毒载体的病毒包装及浓缩;c)外周血DC细胞的分离与培养;d)步骤b)所制备的慢病毒转染步骤c)所述的DC细胞并诱导分化为成熟DC细胞;e)磁珠法分选外周血来源的CD8+T细胞;f)将步骤d)所述的成熟DC细胞与步骤e)所述的CD8+T细胞共培养,获得具有针对7个主要KRAS突变抗原表位的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。
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