[发明专利]一种基于DNA微条形码技术的食用海参物种鉴定方法

摘要

本发明涉及一种基于DNA微条形码的食用海参物种鉴定方法。该方法通过海参基因组DNA提取，然后利用DNA微条形码引物进行PCR扩增，得到长度为257 bp的PCR产物，所述DNA微条形码引物为MiniCOI‑F:CATGGCTTTCCCTCGAATGAA；MiniCOI‑R:TAACTCCTGGGGTTCGCATCT。最后将测序所得的DNA微条形码片段序列在美国国家生物技术信息中心（National Center for Biotechnology Information，NCBI）进行比对，根据序列的匹配相似度进行物种鉴别。该方法操作简便，准确性高，能够鉴别经过加工的、形态学特征消失的市售海参，为维护企业与消费者利益以及正常的市场秩序提供技术支撑。

主权项

1.一种基于DNA微条形码技术的食用海参物种鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）基于不同食用海参（包括海参科、刺参科和瓜参科海参）的COI基因设计一对扩增产物长度小于300 bp的PCR引物；（2）从不同的已知物种信息的海参组织中分离提取DNA，然后将其DNA作为模板，采用步骤（1）利用设计的引物进行聚合酶链式反应扩增海参的COI基因片段，用琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物，PCR产物纯化后进行测序；（3）将测序结果在NCBI（National Center for BiotechnologyInformation）网站上进行分析比对，确定物种信息，同时建立系统发育树，验证建立的DNA微条形码方法鉴定结果的可靠性。