[发明专利]一种海藻粘多糖的纯化方法在审
申请号: | 201711354780.X | 申请日: | 2017-12-15 |
公开(公告)号: | CN109929050A | 公开(公告)日: | 2019-06-25 |
发明(设计)人: | 刘乃山;夏衬来;宋立明 | 申请(专利权)人: | 青岛冠龙生物制药有限公司 |
主分类号: | C08B37/04 | 分类号: | C08B37/04 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266300 山东省青岛市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种海藻粘多糖的纯化方法。本发明的技术方案是将制得的粘多糖先用活性炭吸附除去色素等物质,然后用超滤除去分子量较大的蛋白质等物质,获得合理的多糖,再用凝胶排阻色谱分离柱将混合物通过多孔的凝胶床而达到更好的分离效果。此方法设备简单,重复性好,得到的海藻粘多糖回收率很高。 | ||
搜索关键词: | 海藻粘多糖 凝胶排阻色谱 活性炭吸附 分离效果 混合物 分离柱 粘多糖 色素 超滤 凝胶 回收率 蛋白质 | ||
【主权项】:
1.一种海藻粘多糖的纯化方法,其特征在于:该方法包括如下步骤:(1)、活性炭吸附脱色过程:将一定量的活性炭加入提取液,在35℃~70℃下搅拌1.0h~3.0h后过滤离心,去除活性炭;(2)、超滤:料液用5kDa~2kDa 的超滤膜于35℃~70℃, 0.05MPa~0.25MPa 对料液超滤20min~60min ;(3)、凝胶排阻色谱分离1)凝胶层析柱的制备称取10gSephadex(葡聚糖)LH‑20用250mL洗脱液在沸水浴中加热搅拌3h,加热过程中需不断补充洗脱液,静置过夜,充分溶涨,得到凝胶悬浮液;2. 先在层析柱内加入约1/3柱高的洗脱液,关闭出口,在搅拌下将凝胶悬浮液LH‑20缓慢注入柱子中,待自然沉降1‑2cm后,打开出口,继续加入凝胶悬浮液加到所需高度为止,并在胶面上加一片有机膜以保护胶面,最终柱体积为2*30cm;2)上柱:将一定体积的海藻粘多糖提取液以3.0ml/min速度通过交联葡萄糖凝胶柱SephadexLH‑20,用二次水洗脱,合并流出液;(4)、粘多糖的真空冷冻干燥:在真空度10~20mbar,制冷温度‑35~‑60℃下,分别对凝胶层析柱分离得到的多糖,进行真空冷冻20~30h,便可得到粘多糖 。
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