[发明专利]一种海藻粘多糖的纯化方法

权利要求书

1.一种海藻粘多糖的纯化方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

（1）、活性炭吸附脱色过程：将一定量的活性炭加入提取液，在35℃～70℃下搅拌1.0h～3.0h后过滤离心，去除活性炭；

（2）、超滤：料液用5kDa～2kDa 的超滤膜于35℃～70℃， 0.05MPa～0.25MPa 对料液超滤20min～60min ；

（3）、凝胶排阻色谱分离

1）凝胶层析柱的制备

称取10gSephadex(葡聚糖)LH-20用250mL洗脱液在沸水浴中加热搅拌3h，加热过程中需不断补充洗脱液，静置过夜，充分溶涨，得到凝胶悬浮液；2. 先在层析柱内加入约1／3柱高的洗脱液，关闭出口，在搅拌下将凝胶悬浮液LH-20缓慢注入柱子中，待自然沉降1-2cm后，打开出口，继续加入凝胶悬浮液加到所需高度为止，并在胶面上加一片有机膜以保护胶面，最终柱体积为2*30cm；

2）上柱：将一定体积的海藻粘多糖提取液以3.0ml／min速度通过交联葡萄糖凝胶柱SephadexLH-20，用二次水洗脱，合并流出液；

（4）、粘多糖的真空冷冻干燥：在真空度10～20mbar，制冷温度-35～-60℃下，分别对凝胶层析柱分离得到的多糖，进行真空冷冻20～30h，便可得到粘多糖 。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，活性炭的量为1g/L多糖提取液，吸附时间为1.0h～3.0h。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）中，5kDa～ 2kDa 的超滤膜于35℃～70℃，0.05MPa～0.25MPa 对料液超滤20min～60min 。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（3）的1)中，所制备的凝胶层析柱为Sephadex(葡聚糖)LH-20。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（3）中，所用洗脱液为0.05mol／L三羟甲基氨基甲烷/HCl+0.lmol／L氯化钠(pH=8.O)。