[发明专利]一种利用固定化酶改性提高芝麻蛋白凝胶性的方法

摘要

本发明属于农产品深加工技术领域，具体涉及一种利用固定化酶改性提高芝麻蛋白凝胶性的方法，具体为：首先芝麻粉碎除油后，溶解并调节pH、复酶水解，离心后，将滤饼加入碱液溶解、固定化酶改性，回收固定化酶，离心过滤后，中和滤液、超滤浓缩，喷雾干燥获得改性芝麻蛋白。通过此方法改性后，芝麻蛋白的凝胶性有明显提高，拓展了芝麻蛋白的应用范围，为开发新型芝麻食品提供了原料。同时本发明方法具有绿色高效、成本低廉、产品附加值高等优点，具有极高的市场推广价值。

主权项

1.一种利用固定化酶改性提高芝麻蛋白凝胶性的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）芝麻粉碎除油：将芝麻粉碎，采用有机溶剂萃取芝麻中的油脂，萃取结束后，收集除油后的芝麻粉，备用；

2）复酶水解：将除油后的芝麻粉与水混合配成5－25%的溶液a并调节pH至3.0－5.5，加入复酶于30－60℃水解反应30－120 min，水解完毕后，冷却、静置、离心，收集沉淀a，备用；

3）固定化酶制备：将壳聚糖与环氧氯丙烷按1g：3－5ml的比例混合后于60－70℃反应10－30 min，然后加入壳聚糖质量1－5倍的多胺，并于70－80℃反应5－25 min，反应结束后，收集固体a备用；

在氮气保护下，在0.05－0.2 mol/L的Fe₃O₄溶液中加入等体积的浓氨水，在70－80℃下反应0.5－2 h，反应结束后，收集固体Fe₃O₄微球，储存于pH2－4的蒸馏水中；

将固体a用稀盐酸溶解后，分别加入占壳聚糖质量40－60%、5－20%的固体Fe₃O₄微球和三聚磷酸钠，搅拌均匀，用磁铁吸附固体颗粒，获得磁性壳聚糖微粒；

将磁性壳聚糖微粒加入到含2－6%戊二醛的磷酸缓冲液中配成浓度0.2－0.5%的悬浊液，室温搅拌反应1－4h，然后加入含2－8%谷氨酰胺转移酶的磷酸缓冲液，继续搅拌反应4－6 h，用磁铁吸附微粒，蒸馏水洗净，获得固定化谷氨酰胺转移酶，备用；其中，含2－8%谷氨酰胺转移酶的磷酸缓冲液加入量为悬浊液体积的1－3倍；

4）固定化酶改性：将步骤2）获得的沉淀a与水混合配成5－20%的溶液b并调节pH至7.5－9.0，然后加入固定化谷氨酰胺转移酶于30－65℃改性20－100min，离心，收集滤液备用；

5）改性蛋白回收：将步骤4）所得滤液中和后，超滤膜处理，浓缩至50%时，加入蒸馏水恢复至初始体积，再次使用超滤膜进行超滤处理，重复上述操作2－5次，用蒸馏水调节固形物浓度至5－15%，然后喷雾干燥，即获得成品。

2.如权利要求1所述利用固定化酶改性提高芝麻蛋白凝胶性的方法，其特征在于，步骤2）中，所述复酶是由纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶组成的混合酶，复酶的添加量为除油后芝麻粉质量的0.05－0.50%，其中，复酶中各原料的重量百分比为：纤维素酶30－60%、半纤维素酶15－35%，果胶酶为20－45%。

3.如权利要求1所述利用固定化酶改性提高芝麻蛋白凝胶性的方法，其特征在于，步骤3）中，所述壳聚糖、环氧氯丙烷、多胺的反应在微波反应器中进行；所述的多胺为精胺和/或亚精胺。

4.如权利要求1所述利用固定化酶改性提高芝麻蛋白凝胶性的方法，其特征在于，步骤4）中，固定化谷氨酰胺转移酶的添加量是溶液b的5－15%。

5.如权利要求1所述利用固定化酶改性提高芝麻蛋白凝胶性的方法，其特征在于，步骤5）中，采用的超滤膜截留分子量为8000－50000 Da。