[发明专利]利用光合放氧电子分离快速筛检核诱变固碳藻株的方法有效
申请号: | 201711209339.2 | 申请日: | 2017-11-27 |
公开(公告)号: | CN107841495B | 公开(公告)日: | 2020-11-06 |
发明(设计)人: | 程军;岑可法;王智化;张彦威;周俊虎;刘建忠;周志军;杨卫娟;何勇 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N13/00 | 分类号: | C12N13/00;C12R1/89 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 周世骏 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及生物质能利用技术,旨在提供一种利用光合放氧电子分离快速筛检核诱变固碳藻株的方法。包括:将处于对数生长期的微藻置于钴60‑γ射线核辐照条件下进行诱变,静置恢复后依次进行单个藻株纯化、单株接种和扩大培养;采集微藻样品,分别测试其获得微藻光合放氧速率数据和微藻光合作用反应中心的叶绿素电子分离效率数据;分别选取两组数据中最高的前10名,将同时能列入两个筛选结果中的藻株作为高生长固碳速率的优良藻株。本发明能将筛选核诱变后的高效固碳藻株突变体的劳动耗时由传统直接测量微藻生长速率方法的90天减少到30天,大幅度提高了核诱变藻株突变体的筛选工作效率,显著降低了劳动时间成本。 | ||
搜索关键词: | 利用 光合 电子 分离 快速 检核 诱变 固碳藻株 方法 | ||
【主权项】:
一种利用光合放氧电子分离快速筛检核诱变固碳藻株的方法,其特征在于,包括下述步骤:(1)将处于对数生长期的微藻置于钴60‑γ射线核辐照条件下进行诱变,然后静置恢复一个月;(2)取恢复生长后的微藻接种至由微藻培养基制成的琼脂板中进行单个藻株纯化培养,然后以96孔板接种单株纯化后存活的藻株,再取96个试管分别一一对应接种96孔板的每个孔藻液进行扩大培养,各培养周期均为7天;(3)在96个试管中分别采集1毫升经扩大培养的微藻样品,置于溶氧测试仪的样品槽内,控制溶氧测试仪的光照强度,测量样品槽内由微藻光合作用释放的氧气溶解浓度,进而获得微藻光合放氧速率数据;(4)在96个试管中分别采集50微升经扩大培养的微藻样品,置于快速重复荧光仪的样品槽内,对微藻样品进行光束刺激实验,进而获得微藻光合作用反应中心的叶绿素电子分离效率数据;(5)分别选取光合放氧速率最高的前10名的藻株,以及叶绿素电子分离效率最高的前10名的藻株,将同时能列入两个筛选结果中的藻株作为高生长固碳速率的优良藻株。
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