[发明专利]黔北麻羊BMP4基因原核载体的构建方法在审
申请号: | 201711189949.0 | 申请日: | 2017-11-24 |
公开(公告)号: | CN108220316A | 公开(公告)日: | 2018-06-29 |
发明(设计)人: | 陈祥;李鹏程;孙振梅;龙威海;冯文武;李俊;苑红霞 | 申请(专利权)人: | 贵州大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/66;C12N15/12 |
代理公司: | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人: | 李亮;程新敏 |
地址: | 550025 贵州省贵*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | 本发明公开了一种黔北麻羊BMP4基因原核载体的构建方法。本发明能在构建黔北麻羊BMP4基因原核载体时,免除从组织中提取蛋白的繁琐步骤,简化操作。本发明通过简单的方法克隆黔北麻羊BM4基因并构建原核表达载体,表达纯化重组基因蛋白,通过多克隆抗体制备出BMP4基因的抗体,为黔北麻羊羊基因检测方法的建立提供基础,也为黔北麻羊多胎品系列的选育提供思路。 | ||
搜索关键词: | 构建 原核载体 基因 蛋白 多克隆抗体制备 原核表达载体 繁琐步骤 基因检测 重组基因 抗体 克隆 | ||
【主权项】:
1.一种黔北麻羊BMP4基因原核载体的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:将黔北麻羊卵巢组织RNA经逆转录获得黔北麻羊的cDNA,将黔北麻羊的cDNA经引物PCR扩增获得BMP4基因CDS区序列,将扩增产物回收后与Pucm‑T载体T连接,经培养后提取重组质粒,回收重组质粒和PET32a(+)空载体的双酶切的目的片段进行连接,获得PET32a(+)‑BMP4重组载体,即黔北麻羊BMP4基因原核载体。
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