[发明专利]一种血浆DNA边提取边转化的方法及应用有效
申请号: | 201711139273.4 | 申请日: | 2017-11-16 |
公开(公告)号: | CN107868813B | 公开(公告)日: | 2021-07-27 |
发明(设计)人: | 李奇渊;朱明;刘煜达;张晓龙 | 申请(专利权)人: | 上海覃谷生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 巩克栋 |
地址: | 200135 上海市浦东新区中国(*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种血浆DNA边提取边转化的方法及应用,所述方法包括如下步骤:裂解、转化、分层、结合、漂洗、脱磺基、干燥和洗脱。洗脱后获得的液体即为提取转化后的游离DNA。本发明巧妙地将游离DNA的提取和转化过程合二为一,所述合二为一并不是简单的将提取和转化两个步骤简单叠加,而是采取边提取边转化的方式,即血浆被裂解处理后就开始进行游离DNA的重亚硫酸盐的转化过程,经过分层液处理可以轻易的去处蛋白质,后续纯化的是经转化后的游离DNA(BiscfDNA),相比于传统的方法先纯化cfDNA,转化后再纯化BiscfDNA的过程,大大节省了时间,降低了成本,也减少了BiscfDNA的损失。 | ||
搜索关键词: | 一种 血浆 dna 提取 转化 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种血浆DNA边提取边转化的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)裂解:向血浆中加入裂解缓冲液和蛋白酶K进行裂解;(2)转化:向步骤(1)的混合液中加入重亚硫酸盐粉末,进行转化;(3)分层:向步骤(2)混合液中加入分层液,分层后吸取下层液;(4)结合:向步骤(3)下层溶液中加入结合液与磁珠,进行磁分离,洗脱后得到所述转化后的血浆DNA。
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