[发明专利]一种酶促合成山奈酚的方法有效
申请号: | 201711126059.5 | 申请日: | 2017-11-15 |
公开(公告)号: | CN107880134B | 公开(公告)日: | 2021-03-23 |
发明(设计)人: | 张新跃;张智萍;何妍之;黄岳;陈磊;丁笠;刘雅娴 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N9/02;C12N9/10;C12N15/70;C12P17/06 |
代理公司: | 南京钟山专利代理有限公司 32252 | 代理人: | 戴朝荣;郑慧娟 |
地址: | 225009 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种酶促合成山奈酚的方法,其中涉及两种融合蛋白TrxA‑His‑F3H、TrxA‑His‑FLS1的制备及酶活性检测,并设计缓冲液体系,反应缓冲液为0.1 M Tris‑HCl(pH7.2),100μL反应体系中含有0.4%抗坏血酸、10%甘油、8.2 mMα‑酮戊二酸、0.01 mM硫酸亚铁、0.5 mM柚皮素、3.3μg TrxA‑His‑F3H、1.8μg TrxA‑His‑FLS1;并通过优化反应体系pH值、反应时间和温度,在体外建立一步高效合成山奈酚的方法。CCK‑8法检测合成的山奈酚对肿瘤细胞生长的抑制作用。 | ||
搜索关键词: | 一种 酶促合 成山 方法 | ||
【主权项】:
一种融合蛋白TrxA‑His‑F3H,其特征在于,所述融合蛋白具有如下氨基酸序列:(1)由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;或(2)与序列SEQ ID No.1限定的氨基酸序列同源性在80%至100%编码相同功能蛋白质的氨基酸序列;或(3)SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经增加、缺失或替换一个或多个氨基酸具有同等活性的由(1)衍生的蛋白。
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