[发明专利]一种红耳龟胚胎成纤维细胞系及其构建方法有效
申请号: | 201711092592.4 | 申请日: | 2017-11-08 |
公开(公告)号: | CN107858323B | 公开(公告)日: | 2020-10-09 |
发明(设计)人: | 曹代男;段好冉;魏玉峰;杨江波;万小娟;葛研;龚世平 | 申请(专利权)人: | 广东省生物资源应用研究所 |
主分类号: | C12N5/073 | 分类号: | C12N5/073;C12N15/85;C12N15/65 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人: | 刘明星;胡素丽 |
地址: | 510260 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种红耳龟胚胎成纤维细胞系及其构建方法。它是取孵化至第12~18d的红耳龟卵,挑选活胚后对红耳龟卵进行消毒,去壳取红耳龟胚,弃头、四肢及内脏,余下的胚胎组织用含双抗的PBS冲洗至无明显血迹;将冲洗至无明显血迹的胚胎组织用胰蛋白酶消化,收集消化下来的单细胞,将单细胞接种于完全培养基中静置培养,当细胞部分贴壁且稍加振荡也不浮起时,吸去完全培养基和尚未贴壁的细胞,剩下的贴壁细胞加入新的完全培养基后继续培养;当原代培养的细胞汇合度达到90%以上时,用胰蛋白酶消化,收集单细胞,再接种于完全培养基中进行传代培养。本发明为进一步利用RSTEFs进行基础理论和实验研究奠定了材料和技术基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 红耳龟 胚胎 纤维 细胞系 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
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