[发明专利]一种从重楼中提取纯化重楼皂苷Ⅰ的方法

摘要

本发明公开了一种从重楼中提取纯化重楼皂苷Ⅰ的方法，包括以下步骤：将重楼粉碎为粗粉置于密闭容器中，接菌种发酵，滤干水份并进行灭菌处理，加入7‑9倍的80‑95％的乙醇，微波加热回流提取2次，过滤，合并提取液；将提取液脱色、脱脂，减压浓缩后连续离心沉淀2‑3次，合并上清液；将上清液通过大孔吸附树脂柱，依次用45‑55％、65‑80％的乙醇溶液洗脱，收集65‑80％的乙醇洗脱液，浓缩；将浓缩液采用反相液相色谱分离得到的乙醇和提取物，所得提取物经过结晶、干燥，制得重楼皂苷Ⅰ。本发明的方法提取得率较高，提取的重楼皂苷Ⅰ纯度高，符合规模化生产的要求。

主权项

一种从重楼中提取纯化重楼皂苷Ⅰ的方法，其特征在于：包括以下步骤：S1：将重楼粉碎为粗粉，放入密闭容器中，接菌种发酵36‑48h，发酵完成后使用无菌蒸馏水洗涤3次，滤干水份并进行灭菌处理，加入7‑9倍的80‑95％的乙醇，微波加热回流提取2次，过滤，合并提取液；S2：将步骤S1中的提取液脱色、脱脂，置于60‑65℃的旋转蒸发器中，减压至0.01‑0.02MPa,浓缩至重楼皂苷含量为10‑15％；向浓缩液中加入75‑85％的乙醇溶液，在3000r/min的离心仪中连续离心3次，合并上清液；S3：将步骤S2中的上清液通过大孔吸附树脂柱，条件为：解析剂为46‑58％的乙醇溶液，其用量是大孔吸附树脂体积的1.8‑3.2倍，再生溶剂为2‑3.5％的KOH溶液，吸附区流速6‑10BV/h，解吸区流速10‑20BV/h，再生区流速6‑10BV/h，切换时间为600‑650s，温度为55‑60℃，压力为0.1MPa；依次用45‑55％、65‑80％的乙醇溶液洗脱，收集65‑80％的乙醇洗脱液，浓缩得到浓缩液；S4：将步骤S3中的浓缩液采用反相液相色谱分离得到的乙醇和提取物，所得提取物经过结晶、干燥，制得重楼皂苷Ⅰ。