[发明专利]一种从重楼中提取纯化重楼皂苷Ⅰ的方法有效
申请号: | 201711071721.1 | 申请日: | 2017-11-03 |
公开(公告)号: | CN107619427B | 公开(公告)日: | 2020-09-15 |
发明(设计)人: | 马云川 | 申请(专利权)人: | 广西南宁成远科技有限公司 |
主分类号: | C07J71/00 | 分类号: | C07J71/00 |
代理公司: | 南宁胜荣专利代理事务所(特殊普通合伙) 45126 | 代理人: | 关文龙 |
地址: | 530000 广西壮族自治区南宁*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 重楼 提取 纯化 皂苷 方法 | ||
1.一种从重楼中提取纯化重楼皂苷Ⅰ的方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1:将重楼粉碎为粗粉,放入密闭容器中,接菌种发酵36-48h,发酵完成后使用无菌蒸馏水洗涤3次,滤干水分并进行灭菌处理,加入7-9倍的80-95%的乙醇,微波加热回流提取2次,过滤,合并提取液;所述微波加热回流提取的温度控制在90-95℃,其可通过控制微波辐照量进行控制;所述微波加热回流提取时长为每次10-15min;
S2:将步骤S1中的提取液脱色、脱脂,置于60-65℃的旋转蒸发器中,减压至0.01-0.02MPa,浓缩至重楼皂苷含量为10-15%;向浓缩液中加入75-85%的乙醇溶液,在3000r/min的离心仪中连续离心3次,合并上清液;所述脱色过程为活性炭脱色;所述脱脂过程使用丙酮进行脱脂;
S3:将步骤S2中的上清液通过大孔吸附树脂柱,条件为:解析剂为46-58% 的乙醇溶液,其用量是大孔吸附树脂体积的1.8-3.2倍,再生溶剂为2-3.5%的KOH溶液,吸附区流速6-10BV/h,解吸区流速10-20BV/h,再生区流速6-10BV/h,切换时间为600-650s,温度为55-60℃,压力为0.1MPa;依次用45-55%、65-80%的乙醇溶液洗脱,收集65-80%的乙醇洗脱液,浓缩得到浓缩液;所述大孔吸附树脂为D101;
S4:将步骤S3中的浓缩液采用反相液相色谱分离得到的乙醇和提取物,所得提取物经过结晶、干燥,制得重楼皂苷Ⅰ。
2.根据权利要求1所述的从重楼中提取纯化重楼皂苷Ⅰ的方法,其特征在于:步骤S3中所述乙醇洗脱的流速为2-3BV/h、洗脱时长为15-30min。
3.根据权利要求1所述的从重楼中提取纯化重楼皂苷Ⅰ的方法,其特征在于:步骤S4中所述结晶在12-16℃下进行。
4.根据权利要求1所述的从重楼中提取纯化重楼皂苷Ⅰ的方法,其特征在于:步骤S4中所述干燥的温度为60-70℃,时长为2-3h。
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