[发明专利]一种具有高ACE抑制活性的棉籽蛋白多肽及其制备方法

摘要

本发明的目的在于提供一种提高棉籽蛋白ACE抑制肽的ACE抑制活性的方法。本发明以棉籽蛋白为原料，对棉籽蛋白ACE抑制肽进行Plastein反应修饰，制得的产物ACE抑制率达到90％以上，提高了棉籽蛋白抗ACE抑制肽的活性，为天然高效ACE抑制剂的制备提供一种新途径，为棉籽资源的综合开发利用提供依据。

主权项

一种具有高ACE抑制活性的棉籽蛋白ACE抑制肽，其特征在于：制备方法为：(1)脱酚棉籽粕粉按料液比为1：25(g/mL)加入蒸馏水，用1mol/L NaOH溶液调节体系pH值至11.5，在50℃下浸提2h，然后6000r/min离心15min，分离得上清液，用1mol/L的盐酸溶液调节上清液的pH值至等电点4.3，再10000r/min离心15min，得到蛋白质沉淀，经透析、真空冷冻干燥得到棉籽蛋白质干粉；(2)棉籽蛋白质干粉配成质量分数为5％的棉籽蛋白质溶液，调节pH值至7.5，加入木瓜蛋白酶(30000U/mL，E/S＝1.2％)，43.5℃下水解4h，然后95℃水浴灭酶15min，再加入4ml质量分数为10％的三氯乙酸TCA，10000r/min离心15min(沉降酶蛋白和未酶解的棉籽蛋白质)，收集上清液，真空冷冻干燥得到棉籽蛋白ACE抑制肽；(3)将棉籽蛋白ACE抑制肽用蒸馏水配制成底物浓度为10％的悬浮液，按酶与底物浓度比为2000.11U/g的比例加入木瓜蛋白酶，再按0.5mol/mol棉籽蛋白ACE抑制肽游离氨基的外源氨基酸比例加入亮氨酸，调节pH值至7.5，30℃恒温水浴5h，95℃水浴灭酶15min，冷却至室温，10000r/min离心15min，收集上清液，真空冷冻干燥，即得。