[发明专利]制备小型动物透明骨骼标本的方法及以该方法制备的标本

摘要

本发明涉及一种制备小型动物透明骨骼标本的方法以及该方法制备得到的标本。本发明采用化学试剂使小动物肌肉变得透明，并采用染色剂进行浸泡，对动物身体不同部位进行显色和区分，直观准确地展现动物体硬骨和软骨原有的位置结构。本发明方法步骤简便，采用的试剂安全，可以用于制备金鱼、热带鱼、蛙或小鼠等小型动物的透明骨骼标本，制备得到的标本保持时间长久，显示结构清晰，有较高的科研和教学用价值。

主权项

一种制备小型动物透明骨骼标本的方法，所述方法包括下列步骤：(1)预处理：对新鲜小动物尸体进行解剖学处理，清洗干净，将动物体在无水乙醇中浸泡3‑14天，优选5‑10天，以使动物体硬化；(2)去除脂肪：将动物体浸入溶脂质性溶液中约24‑72小时，优选36‑48小时，以去除脂肪，将动物体再次浸入无水乙醇中，浸泡约12‑36小时；(3)选择性地进行软骨染色：配制阿利新蓝在体积比为2：1‑8：1(优选3：1‑5：1)的无水乙醇和冰醋酸中的饱和溶液，将动物体浸入其中约12‑60小时(优选24‑48小时)，从而为软骨染色；(4)肌肉预透明处理：用纯净水浸泡，并不断换液以去除残留溶液；浸入约0.5‑5％(优选1‑3％，更优选1‑2％)氢氧化钾稀溶液中约2‑8小时，优选4‑6小时，以使肌肉呈半透明状态；选择性地，采用注射器吸取氢氧化钾溶液对动物体内部进行多次抽吸以清洗内脏和脑部；(5)硬骨染色：配制茜素红在无水乙醇中的饱和溶液，加入5‑15倍体积(优选8‑15倍体积)的0.5‑5％(优选1‑3％，更优选1‑2％)氢氧化钾稀溶液，浸泡动物体约24‑72小时(优选36‑60小时)，从而为硬骨染色；(6)脱色：用纯净水浸泡，并不断换液以去除残留溶液，浸入1‑10％(优选2‑5％)过氧化氢溶液2‑6小时，从而进行脱色；(7)透明化处理并置换成保存液：采用体积比为10:1‑4:1的0.5‑5％(优选1‑2％)氢氧化钠稀溶液与甘油的混合溶液浸泡3‑10天(优选2‑8天)进行脱色，之后逐步换成升序浓度的甘油溶液，每个梯度浸泡2‑4天，最后将标本浸泡在纯甘油中。