[发明专利]一种同时检测尿液中毒死蜱3种代谢产物的方法及装置

摘要

本发明公开了一种同时检测尿液中毒死蜱3种代谢产物的方法及装置。所述方法包括以下步骤：(A)目标化合物选择：3,5,6‑三氯‑2‑吡啶醇、磷酸二乙酯、硫代磷酸二乙酯；(B)样品酶解；(C)样品提取；(D)样品净化与浓缩；(E)仪器分析：所述装置主要包括：主体和色谱－离串联质谱检测仪，所述主体内包含电源装置、解冻装置、离心装置一、水浴装置、涡旋混合装置、离心装置二、净化装置、旋转蒸发装置、PLC控制器。本发明的装置具有简洁快速的优点，实现了智能化控制，可控性强，准确度高。本发明的方法大大提高了检测的有效性和可靠性，节省了检测时间和检测费用。

主权项

1.一种同时检测尿液中毒死蜱3种代谢产物的方法，其特征在于，包括以下步骤：(A)目标化合物选择毒死蜱的3种体内代谢产物：3,5,6‑三氯‑2‑吡啶醇、磷酸二乙酯、硫代磷酸二乙酯；(B)酶解：取冰冻尿样于室温下缓慢解冻，取10mL尿样于50mL离心管中，加入4mL 6M HCl振荡，于80℃水浴条件下水解2h，2h后取出，降至室温；(C)提取：尿样中加入10mL乙腈溶液，3g NaCl，涡旋混合1min后，离心分离，取上层5mL乙腈；(D)净化与浓缩：将提取后的乙腈过自制净化小柱，上样完毕后，再以5mL乙腈洗脱，收集所有洗脱液，旋转蒸发至干，氮气吹干后，1mL乙腈定容，待测样品在‑20℃的环境中避光保存，测试前加入内标磷酸二正丁酯；(E)待测样品使用色谱－串联质谱检测，色谱选择超高效液相色谱仪，色谱条件：色谱柱选择反相C18色谱柱，柱温为35℃，流动相A为0.2‰氨水，流动相B为乙腈，进样体积为2μL，质谱条件：电离方式电喷雾离子源，负离子模式，多反应离子监测(MRM)，离子源温度：500℃，离子喷雾电压：‑4500V，气帘气(curtain gas,CUR)压力为35psi，喷雾气(ion source gas 1,GS1)压力为50psi，辅助加热气(ion source gas 2,GS2)压力为55psi；所述步骤(E)中的流动相流速为0.3mL/min左右，梯度洗脱程序为0～2min，99％A:1％B，2～3min，70％A:30％B，3～10min，5％A:95％B，10～13min，5％A:95％B，13.1～15min，99％A:1％B。