[发明专利]一种同时检测尿液中毒死蜱3种代谢产物的方法及装置

说明书

本发明公开了一种同时检测尿液中毒死蜱3种代谢产物的方法及装置。所述方法包括以下步骤：(A)目标化合物选择：3,5,6‑三氯‑2‑吡啶醇、磷酸二乙酯、硫代磷酸二乙酯；(B)样品酶解；(C)样品提取；(D)样品净化与浓缩；(E)仪器分析：所述装置主要包括：主体和色谱－离串联质谱检测仪，所述主体内包含电源装置、解冻装置、离心装置一、水浴装置、涡旋混合装置、离心装置二、净化装置、旋转蒸发装置、PLC控制器。本发明的装置具有简洁快速的优点，实现了智能化控制，可控性强，准确度高。本发明的方法大大提高了检测的有效性和可靠性，节省了检测时间和检测费用。

技术领域

本发明涉及农药检测技术领域，具体是涉及一种同时检测尿液中毒死蜱3种代谢产物的方法及装置。

背景技术

毒死蜱属于一种广泛用于农作物多种病虫害防治的广谱性有机磷杀虫剂。毒死蜱是我国杀虫剂市场的主导农药品种，在世界上的生产量和使用量也居高不下。毒死蜱可通过食物、空气、土壤等介质暴露进入人体。

毒死蜱可抑制胆碱酯活性，而中枢神经系统的乙酰胆碱酯酶对维持中枢神经系统神经细胞的发生和成熟具有重要作用。越来越多的研究证实毒死蜱对发育期的中枢神经系统存在慢性毒性作用，与儿童注意多动缺陷障碍、记忆力减退、认知障碍等相关。欧美等发达国家对毒死蜱污染对儿童的智力与生长发育影响给予了高度关注。环境污染带来的健康风险一直以来就是人们关注的焦点，人体内暴露水平是确定环境污染物人体负荷浓度的关键指标，也是最直接的指标。部分有机污染物进入人体后会发生代谢，产生多种代谢产物，准确定量污染物的内暴露，须同时测定该物质的多种代谢产物。

2016年《职业卫生与应急救援》第34卷第4期278-281页中介绍了一种使用气相色谱法测定血浆中3,5,6-三氯-2-吡啶醇的方法，本法对3,5,6-三氯-2-吡啶醇检出下限为3μg/L。2015年《理化检验-化学分册》第51卷第9期927-931页中介绍了一种利用气相色谱串联质谱法对鱼肉中3,5,6-三氯-2-吡啶醇的分析方法，线性范围为1.0～1000μg/L，检测下限0.3μg/kg。2015年《环境污染与防治》第37卷第9期80-83页中介绍了一种利用双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺进行衍生化，测定毒死蜱及其代谢产物的方法，主要使用固相萃取富集，利用气相色谱质谱联用方法测定水样中3,5,6-三氯-2-吡啶醇的方法，检出限为0.100μg/L。2016年《中国职业医学》第43卷第5期590-596页中介绍了一种利用超高效液相色谱对血浆中3,5,6-三氯-2-吡啶醇进行检测的方法，线性范围为1.00～50.00mg/L，检出限为0.30mg/L。2013年《色谱》第31卷第9期903-907页中介绍了一种利用超高效液相色谱-串联质谱法测定人尿中3,5,6-三氯-2-吡啶醇的方法，方法检出限为0.41μg/L。

综上所述，已有的文献报道主要针对血浆、水样中的毒死蜱代谢产物，尿液中毒死蜱代谢产物的检测方法研究较少，且仅关注3,5,6-三氯-2-吡啶醇一种代谢产物。然而，毒死蜱进入人体后，在体内发生代谢产生3,5,6-三氯-2-吡啶醇之外，还会产生磷酸二乙酯、硫代磷酸二乙酯等2种重要的代谢产物，同时快速准确地定量测定尿液中毒死蜱3种代谢产物是准确衡量毒死蜱人体内暴露的前提条件，对于准确定量毒死蜱的人体负荷具有重要作用。

且以往的方法中使用的气相色谱-火焰离子化检测器、气相色谱-电子捕获检测器、气相色谱-氮磷检测器、高效液相色谱-紫外检测器等，对于同时检测3种毒死蜱代谢产物方面，在面对背景复杂、干扰物质多时，无法准确定性定量，甚至出现假阳性结果，远远无法对人体样本(如尿液、血浆)中痕量毒死蜱代谢产物的分析监测要求。

发明内容

本发明解决的技术问题是针对当前人体尿液中毒死蜱代谢产物同时检测的方法匮乏，本发明提供一种同时定量尿液中毒死蜱3种主要代谢产物的检测方法，建立了毒死蜱3种代谢产物尿液样品检测的酶解、提取、净化与浓缩的方法，同时建立并优化了3种主要代谢产物同时检测的高效液相色谱和二级质谱(MS/MS)检测方法。

本发明的技术方案是：