[发明专利]一种纯化与扩增人骨髓间充质干细胞的制备方法有效
申请号: | 201710786745.9 | 申请日: | 2017-09-04 |
公开(公告)号: | CN107418930B | 公开(公告)日: | 2020-05-12 |
发明(设计)人: | 李新峰 | 申请(专利权)人: | 上海莱馥医疗科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人: | 黄志达;魏峯 |
地址: | 201114 上海市闵*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种纯化与扩增人骨髓间充质干细胞的制备方法,包括:(1)采用基于抗体的负向分选法收集间充质干细胞;(2)采用无血清培养基扩增间充质干细胞。本发明优于常规的分离方法,在安全性和扩增能力方面,本发明提供的无血清培养基明显好于常规的有血清培养基,具有良好的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 纯化 扩增 骨髓 间充质 干细胞 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种纯化与扩增人骨髓间充质干细胞的制备方法,包括:(1)采用基于抗体的负向分选法:在骨髓中加入抗体混合物使非目标细胞和红细胞交联,经密度梯度离心,从血浆层下层收集间充质干细胞;(2)采用无血清培养基扩增间充质干细胞,其中,无血清培养基添加以下组分:重组人胰岛素:1~10μg/ml;重组人表皮生长因子:10~50ng/ml;重组人碱性成纤维细胞生长因子:10~50ng/ml;重组人转化生长因子‑β:1~50ng/ml;重组人血小板衍生生长因子‑BB:10~50ng/ml;氢化可的松:0.5~10μg/ml;维生素C:10~100μg/ml;还原型谷胱甘肽:1~5mM;重组人转铁蛋白:0.5~10μg/ml;乙醇胺:1~10μg/mL;L‑谷氨酰胺:1~10mM;辅酶A:1~50μg/ml;重组人凝血酶:1~10U/ml;庆大霉素:1~100μg/ml;亚硒酸钠:1~100ng/ml。
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