[发明专利]一种黄芪种苗的培养方法

摘要

本发明是一种黄芪种苗的培养方法，所述培养方法为利用间歇浸没式生物反应器进行培养，该培养方法包括如下步骤：（1）外植体的准备（2）增殖培养（3）生根培养。本发明为第一次公开利用间歇浸没式培养方法进行黄芪种苗的培养，具有种苗培养周期短、种苗质量高、生根效果好、生产成本低的优点，为黄芪种苗的培养与生产提供了一个新的技术。

主权项

1.一种黄芪种苗的培养方法，所述培养方法包括外植体的准备、增殖培养和生根培养，其特征在于：所述培养方法为利用间歇浸没式生物反应器进行培养，其中：所述培养方法包括如下具体步骤：（1）外植体的准备：将黄芪组培苗在无菌操作台中，切成黄芪茎段，接种到装有1L液体培养基的三角瓶中，密封包扎后放到培养室中培养3~5天；（2）增殖培养：将步骤（1）中的准备的外植体连同液体培养基倒入间歇浸没式生物反应器的罐体中，将所述罐体连接到反应器系统中，设定反应器的间歇浸没频率，在培养室中培养15~20天；（3）生根培养：在无菌条件下将增殖培养完成的生物反应器罐体中的液体培养基倒出，倒入1L促进黄芪组培苗生根的液体培养基，将上述换液完成的反应器罐体连接到反应器系统中，设定反应器间歇浸没频率，在培养室中培养20~30天；在所述步骤（1）中，所述黄芪茎段为含有1~3个叶芽黄芪组培苗茎段，所述液体培养基配方为：MS+IBA0.05~0.07mg/L+6‑BA0.3~0.6 mg/L+蔗糖30g/L pH5.8~6.0，所述三角瓶连同液体培养基一起进行高温高压湿热灭菌冷却后备用，接种到三角瓶中黄芪茎段的数量50~200个；在所述步骤（2）中反应器间歇浸没频率为：浸没时间1~10min，间隔时间2~12h；在所述步骤（3）中促进黄芪组培苗生根的液体培养基配方为：1/2MS+NAA0.1~0.3 mg/L+IBA0.3~0.5 mg/L+AC0.1~0.3g/L+蔗糖40g/L pH 5.8~6.0；在所述步骤（3）中反应器间歇浸没频率为：浸没时间1~8min，间隔时间4~16h。