[发明专利]检测猪流行性腹泻病毒的核酸、实时荧光RT‑RPA试剂盒及方法在审
申请号: | 201710723183.3 | 申请日: | 2017-08-22 |
公开(公告)号: | CN107299156A | 公开(公告)日: | 2017-10-27 |
发明(设计)人: | 王建昌;刘立兵;王金凤;石蕊寒;南汇珠 | 申请(专利权)人: | 河北省检验检疫科学技术研究院 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 石家庄国为知识产权事务所13120 | 代理人: | 林艳艳 |
地址: | 050051 河*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | 本发明涉及生物监测技术领域,具体公开一种检测猪流行性腹泻病毒的核酸、实时荧光RT‑RPA试剂盒及方法。所述实时荧光RT‑RPA方法,包括如下步骤从样品中提取RNA,所得的RNA进行等温扩增,将反应体系加入到装有冻干酶制剂的反应管中,补加醋酸镁溶液,于40℃恒温反应20min;待测样品中有明显的扩增曲线,则判定为阳性。本发明所提供的实时荧光RT‑RPA方法操作简便,特异性强,灵敏性高,并且不需要复杂的仪器设备,能够在4‑15 min内实现对PEDV阳性样品的快速检测。 | ||
搜索关键词: | 检测 流行性 腹泻 病毒 核酸 实时 荧光 rt rpa 试剂盒 方法 | ||
【主权项】:
一种检测猪流行性腹泻病毒的核酸,其特征在于:包括检测猪流行性腹泻病毒的上游引物、下游引物和exo探针,其中,所述上游引物的序列如SEQ ID No.1所示,所述下游引物的序列如SEQ ID No.2所示,所述exo探针的序列如SEQ ID No.3所示,其中,所述exo探针的第30位T碱基标记荧光基团,第33位T碱基标记荧光淬灭基团,第32位为脱碱基位点,且原T碱基替换为四氢呋喃。
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