[发明专利]木聚糖酶突变体有效
| 申请号： | 201710712383.9 | 申请日： | 2017-08-18 |
| 公开（公告）号： | CN109402091B | 公开（公告）日： | 2022-02-11 |
| 发明（设计）人： | 吴秀秀;邵弨;黄亦钧 | 申请（专利权）人： | 潍坊康地恩生物科技有限公司;青岛蔚蓝生物集团有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/81;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 张柳;赵青朵 |
| 地址： | 261500 山东省潍坊市*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及蛋白质工程改造技术领域，特别涉及耐热性得到提高的木聚糖酶突变体。本发明通过定点突变的方法在木聚糖酶中人为引入两个或三个非自然二硫桥，获得了耐热性提高的突变体XynA1和XynA2，尤其是引入三个二硫桥的突变体XynA2，其在80℃处理5min后酶活残留率高达75％，比突变体XynA1的酶活残留率提高了72％。本发明进一步筛选获得三个能显著提高突变体耐热性的突变位点Q51N，H143K，Q161F，所述突变位点以单点或两点组合或三点组合的方式引入木聚糖酶XynA1和XynA2，均能有效提高其耐热性。 | ||
| 搜索关键词： | 聚糖 突变体 | ||
【主权项】：
1.一种木聚糖酶突变体，其特征在于，其包括二硫桥，所述二硫桥包括T1C‑T27C、Q33C‑T187C或S109C‑N153C中的一个或多个；且其具有(I)、(Ⅱ)或(Ⅲ)所示的氨基酸序列中任意一个：(I)与木聚糖酶的氨基酸序列SEQ ID NO:1具有至少95％同源性的序列；(Ⅱ)具有所述木聚糖酶的至少一个免疫表位，且所述木聚糖酶的氨基酸序列SEQ ID NO:1经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸获得的氨基酸序列；(Ⅲ)由如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列或其互补序列或因遗传密码的简并性而与如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列或其互补序列的核苷酸序列不同的序列编码的氨基酸序列；所述取代为第51位、第143位或第161位的一个或多个氨基酸被取代。
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