[发明专利]种牛精液低温保存方法

摘要

本发明公开了种牛精液低温保存方法，包括以下步骤精液的采集、精液的检测、稀释液的配制、精液稀释、冷冻保存。本发明种分三次进行精液的稀释从而达到目标粘度，每进行一次稀释后均会降低稀释后的牛精液的温度，牛精液在低温下的存活率高，缓慢降低精液的保存温度，有利于提高精子活率，为精子提供了足够的温度适应时间。

主权项

种牛精液低温保存方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、精液的采集：采集成熟度好的牛精液，存放于2‑4℃无菌的环境下备用；S2、精液的检测：对步骤S1中的精液进行品质检测；S3、稀释液的配制：制备出具有冷冻精液功能的稀释液；S4、精液稀释：步骤S3中的稀释液预热后对步骤S2中品质检测达标的精液进行稀释，所述稀释步骤包括以下子步骤：A、步骤S3中的稀释液预热到30‑37℃后，按稀释液∶精液的体积比为1∶0.5对精液进行第一次稀释，精液第一次稀释后降温至15‑20℃并平衡1小时；B、步骤S3中的稀释液预热到30‑37℃后，按稀释液∶精液的体积比为1∶1对步骤A中第一次稀释后的精液进行第二次稀释，精液第二次稀释后降温至5‑10℃并平衡1小时，所述第二次稀释的稀释液量基于第一次稀释前的精液量；C、步骤S3中的稀释液预热到30‑37℃后，按稀释液∶精液的体积比为1∶1对步骤B中第二次稀释后的精液进行第三次稀释，精液第二次稀释后降温至2‑4℃并平衡1小时，所述第三次稀释的稀释液量基于第一次稀释前的精液量；S5、冷冻保存：将步骤S4中经三次稀释后的精液用程序化冷冻仪进行冷冻，冷冻结束后抽检并移入液氮罐中进行保存和使用。