[发明专利]一种测定糖化血红蛋白含量中化学发光板的包被方法

摘要

本发明公开了一种测定糖化血红蛋白含量中化学发光板的包被方法，其包括以下步骤①制备包被过程中的使用液，该使用液包括包被液、清洗液、复合酶液、偶联液、保护液，②选取聚苯乙烯微孔板，③聚苯乙烯微孔板的每孔加入50微升的偶联液，室温条件下孵育30min，用清洗液清洗3次，每次5min；④聚苯乙烯微孔板的每孔再加入100微升的包被液，偶联过程中温度条件为室温，时间为1h，用清洗液清洗3次，每次5min；⑤再每孔加入50微升的保护液，低温，风干。本发明的包被方法能够准确地对糖化血红蛋白的含量进行定量定性分析，该化学发光板的包被方法能够提升检测试剂盒的性能指标，使其具有较高的灵敏度，较宽的线性范围等特点。

主权项

一种测定糖化血红蛋白含量中化学发光板的包被方法，其特征在于，包括以下步骤：①制备包被过程中的使用液，该使用液包括包被液、清洗液、复合酶液、偶联液、保护液，②选取材质为96孔白色不透明的聚苯乙烯微孔板，③聚苯乙烯微孔板的每孔加入50微升的偶联液，室温条件下孵育30min，用清洗液清洗聚苯乙烯微孔板3次，每次5min；④聚苯乙烯微孔板的每孔再加入100微升的包被液，偶联过程中温度条件为室温，时间为1h，用清洗液清洗聚苯乙烯微孔板3次，每次5min；⑤再在聚苯乙烯微孔板的每孔加入50微升的保护液，低温，风干，所述包被液由40mM的pH＝7.4的磷酸盐缓冲液、4.5ug/mL的糖化血红蛋白抗体、质量分数为0.05％的Brij‑35、质量分数为1.5％的蔗糖、质量分数为0.05％的PC‑300组成，所述4.5ug/mL的糖化血红蛋白抗体制备过程如下：选取糖化血红蛋白抗体，加入50微升复合酶液，酶切过程中温度条件为37℃，时间为1.5h，所述清洗液由40mM的pH＝7.4的磷酸盐缓冲液、质量分数为0.05％的Tween‑80组成，所述复合酶液是由胃蛋白酶和木瓜蛋白酶组成，胃蛋白酶和木瓜蛋白酶的质量比例为1:1，所述偶联液采用1.5mM的N,N’‑羰基二咪唑的醇溶液，所述保护液采用质量分数为50％的甘油‑磷酸盐缓冲液。