[发明专利]一种快速检测石蒜科植物中加兰他敏含量的方法

摘要

一种快速检测石蒜科植物中加兰他敏含量的方法，以液质联用技术为基础，进行等度洗脱，以液相色谱串联二级质谱，在正离子扫描下以Full MS/dd‑MS2模式或MRM模式进行分析，能快速提取并准确定性定量分析石蒜科植物中的生物碱类物质加兰他敏，大幅缩短分析时间，提高分析准确度，可在3.0min以内的程序时间内得到检测结果，加兰他敏的保留时间在1min以内，回收率为95.7～97.1％，相对标准偏差为1.3～2.7％，无其他特征峰干扰，分离度为完全分离，大大提高了分析速度和准确性，为研究石蒜科植物中加兰他敏的积累规律和合成代谢调控提供了有效且准确的分析方法。

主权项

一种快速检测石蒜科植物中加兰他敏含量的方法，包括如下步骤：1)配制待测样品液称取待测样品，冷冻干燥后研磨成粉，以醇类有机溶剂作为提取剂，进行至少两次超声提取、混匀、离心，合并上清，浓缩，再复溶，稀释至浓度0.5～100ng/ml，得待测样品溶液；2)检测利用液相色谱‑串联二级质谱对待测样品溶液进行检测，获得样品中加兰他敏的峰面积数据；其中，色谱条件：液相色谱柱：硅胶型反相色谱柱；柱温：40～50℃；进样量：5～10μL；流速：0.4～1.0ml/min；流动相：流动相A：甲酸‑水溶液，流动相B：乙腈或甲醇；洗脱方法：等度洗脱，洗脱时间≤3.0min，流动相A和流动相B的体积比为10～50：50～90；质谱条件及扫描方式：离子源：加热电喷雾离子源或电喷雾离子源；离子源喷雾电压：2500～4500V；扫描方式：正离子扫描下以一级质谱全扫描‑数据依赖子离子扫描模式或多反应检测模式进行分析；监测离子对：母离子m/z 288±1Da和至少一个加兰他敏的子离子；加兰他敏保留时间：≤1min；3)含量计算根据步骤2)的峰面积数据和加兰他敏的标准曲线获得待测样品溶液中加兰他敏的浓度，再结合步骤1)中复溶溶剂体积以及待测样品干重，计算样品中加兰他敏的含量。