[发明专利]一种同时富集检测饮用水中酚类、雌激素类和雄激素类内分泌干扰物的方法

摘要

本发明涉及一种同时富集检测饮用水中酚类、雌激素类和雄激素类内分泌干扰物的方法，首先采用固相萃取法(SPE)对预处理后的水样浓缩富集，然后利用高效液相色谱串联质谱(LC‑MS/MS)进行分析检测，最后，根据样品的分析色谱图及三类EDCs的标准工作曲线确定水样中三类EDCs的浓度。与现有技术相比，本发明实现了饮用水中痕(微)量典型酚类、雌激素和雄激素三类EDCs的同时富集检测，避免了不同类型EDCs单独分析检测的繁琐，大大节省了测样时间，降低了检测成本，同时，检测结果精度可靠，检出限低，相对标准偏差小等。

主权项

1.一种同时富集检测饮用水中酚类、雌激素类和雄激素类内分泌干扰物的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品预处理：取水样过滤除去悬浮物，调pH并加入络合剂，再加入内标物，完成预处理；(2)目标物EDCs浓缩富集：先对SPE小柱进行活化，将步骤(1)预处理后的水样过柱萃取富集，然后取淋洗液淋洗小柱，并真空干燥除去水分，之后继续用洗脱溶剂洗脱目标物，收集洗脱液，在氮气流下吹近干，并用有机溶液定容，最后，将其过滤转移至棕色进样瓶中待测；(3)标准工作曲线制作：以每种EDCs与相应内标物浓度比值为横坐标，以每种EDCs定量子离子与相应内标物峰面积比值为纵坐标，分别绘制三类EDCs的标准工作曲线；(4)仪器分析检测：采用LC‑MS/MS分析步骤(2)浓缩富集后的样品，确定样品中各目标物EDCs的定量子离子与相应内标物的峰面积比值，结合步骤(3)绘制的标准工作曲线，得到样品中各EDCs与相应内标物浓度比值，再乘以步骤(1)加入的各内标物的浓度，即可确定样品中各EDCs的含量；步骤(2)的目标物浓缩富集过程中：SPE小柱选用Oasis HLB固相萃取小柱，并用5‑10mL等体积的甲醇、超纯水和稀盐酸溶液依次通过SPE小柱进行活化，进行富集浓缩的水样体积为500mL，淋洗液选用体积比为5％的甲醇/水溶液，真空干燥时间定为20min，温度为室温25℃，洗脱溶剂选用10mL体积比为85％/15％的乙酸乙酯/甲醇溶液，氮气流吹近干时控制洗脱液的水浴温度为35℃，有机溶液采用体积比为50％的甲醇/水溶液，定容后过滤转移时采用0.22μm PTFE针式过滤器过滤；步骤(1)中的预处理过程中：过滤采用0.7μm孔径的玻璃纤维膜作为滤膜，pH值调节为5.0，络合剂选用Na₂EDTA，酚类DCs的内标物选用200μg/L的双酚A‑D16，雌性激素EDCs的内标物选用200μg/L的雌二醇‑D2，雄性激素EDCs的内标物选用100μg/L的睾酮‑D3；所述LC‑MS/MS的运行参数为：(a)液相色谱运行参数为：有机流动相为含0‑5mM乙酸铵的甲醇和乙腈混合溶液，甲醇/乙腈＝1：1，v/v，水相为0‑5mM的乙酸铵水溶液，梯度洗脱程序：0到6min，70％的水相流动相线性降低到5％并保持6min，在13min时回到70％并保持5min，进样流速为0.25‑0.45mL/min，进样体积为5‑20μL；(b)质谱的运行参数为：采用正电喷雾电离源ESI+和负电喷雾电离源ESI‑，其中，BPA、BPS、NP、E1、E2、E3、EE2、DES、BPA‑D16和E2‑D2采用ESI‑模式，Tren、TES、Me‑TES和TES‑D3采用ESI+模式；干燥气温度为350℃；气体流为11L/min；正电离模式毛细管电压4000v；负电离模式毛细管电压3000v；雾化器压力为15psi；在多反应监测MRM模式下，通过母离子和子离子两个特征离子，对目标EDCs进行定量分析，其中，BPA、BPS、NP、E1、E2、E3、EE2、DES、Tren、TES、Me‑TES、BPA‑D16、E2‑D2和TES‑D3的碎裂电压V/碰撞能eV分别为120/30、153/33、111/30、161/37、192/59、138/62、169/69、134/31、137/25、135/27、135/28、125/30、169/56和152/27。