[发明专利]一种便捷的MDA‑MB‑231乳腺癌细胞的冻存方法在审
| 申请号： | 201710524407.8 | 申请日： | 2017-06-30 |
| 公开（公告）号： | CN107211995A | 公开（公告）日： | 2017-09-29 |
| 发明（设计）人： | 曹先艳;王文峰;施亮 | 申请（专利权）人： | 太仓东浔生物科技有限公司 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02 |
| 代理公司： | 苏州市方略专利代理事务所(普通合伙)32267 | 代理人： | 马广旭 |
| 地址： | 215400 江苏省苏州市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种便捷的MDA‑MB‑231乳腺癌细胞的冻存方法，用移液枪将培养基吸尽，加入PBS洗涤MDA‑MB‑231乳腺癌细胞2‑3次，向细胞培养皿中加入0.38%的胰蛋白酶，于37℃条件下消化3‑5min，加入2‑3ml的新鲜的培养基，使用移液枪吹打细胞培养皿底部40‑50次；将液体移至细胞离心管中，在1000‑1500g/min条件下离心3‑10min，用移液枪去除上清液，加入冻存液，使用移液枪上下吹打细胞40‑50次，加入到细胞冻存管中，拧紧冻存管盖，用封口膜封住冻存管；在2‑7℃保存10‑30min，再于‑15 ‑ ‑20℃保存40‑60min，然后移入到≤‑80℃环境进行细胞冻存。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 便捷 mda mb 231 乳腺 癌细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种便捷的MDA‑MB‑231乳腺癌细胞的冻存方法，其特征在于：包括以下步骤：用移液枪将培养基吸尽，加入3‑5ml PBS洗涤MDA‑MB‑231乳腺癌细胞2‑3次，向细胞培养皿中加入1‑2ml 0.38%的胰蛋白酶，于37℃条件下消化3‑5min，加入2‑3ml的新鲜的MDA‑MB‑231乳腺癌细胞专用培养基，使用移液枪吹打细胞培养皿底部40‑50次；将液体移至细胞离心管中，在1000‑1500g/min条件下离心3‑10min，用移液枪去除上清液，加入MDA‑MB‑231乳腺癌细胞专用冻存液，使用移液枪上下吹打MDA‑MB‑231乳腺癌细胞40‑50次，加入到细胞冻存管中，拧紧冻存管盖，用封口膜封住冻存管；在2‑7℃保存10‑30min，再于‑15 ‑ ‑20℃保存40‑60min，然后移入到≤‑80℃环境进行细胞冻存；其中所述MDA‑MB‑231乳腺癌细胞专用冻存液以重量组分计，包括以下组分：二甲基亚砜5‑15份、羟甲基淀粉2‑5份、海藻糖3‑12份、维生素E0.5‑3份、25%山梨醇1‑5份、丙二醇0.8‑1.6份、(S)‑(‑)‑1‑(4‑氟异喹啉‑5‑基)磺酰基‑2‑甲基‑1,4‑二氮环庚烷0.5‑2份和基础培养基80‑90份。
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