[发明专利]一种以732阳离子交换树脂提高谷氨酸脱羧酶活性的方法

摘要

本发明涉及一种利用732阳离子交换树脂提高屎肠球菌谷氨酸脱羧酶活性的方法，属于生物技术领域；本发明是以732阳离子交换树脂作为屎肠球菌谷氨酸脱羧酶的酶活促进剂，按照732阳离子交换树脂质量∶L‑谷氨酸溶液体积∶屎肠球菌菌悬液或谷氨酸脱羧酶游离酶液体积为1∶1∶1的比例混合构建732阳离子交换树脂‑谷氨酸脱羧酶复合催化体系，当于80r/min、37℃～43℃水浴振荡器反应或搅拌罐中低速搅拌反应24 h～36 h，γ‑氨基丁酸的产量可提高25.31%～143.23%。本发明提供的方法中，732阳离子交换树脂除了显著提高谷氨酸脱羧酶的活性外，其对γ‑氨基丁酸的交换吸附作用也是一种γ‑氨基丁酸纯化的过程，简化了下游提取纯化工艺，降低生产成本；方法简便，绿色环保。

主权项

一种以732阳离子交换树脂提高谷氨酸脱羧酶活性的方法，其特征在于，将已再生或预处理的732阳离子交换树脂用pH 4.2～pH 4.6、0.2 mol/L 乙酸‑乙酸钠缓冲液充分平衡，再用底物溶液充分平衡，然后按732阳离子交换树脂质量∶底物溶液体积∶屎肠球菌GDMCC 60203菌悬液或谷氨酸脱羧酶游离酶液体积为1∶1∶1的比例混合，于80 r/min、37℃～43℃水浴振荡器反应或搅拌罐中低速搅拌反应24 h～36 h，转化反应过程中通过0.1 mol/L～0.5 mol/LHCl控制转化体系的pH为4.2～4.6；所述底物为L‑谷氨酸或L‑谷氨酸一钠；所述底物溶液的浓度为0.2 mol/L～0.3 mol/L，制备方法是将底物溶于0.2 mol/L 乙酸‑乙酸钠缓冲液，调节溶液的pH为4.2～4.6。