[发明专利]丹参组织培养中愈伤分化生芽培养工艺

摘要

本发明公开了丹参组织培养中愈伤分化生芽培养工艺，包括以下步骤1)培养基的配制；2)外植体的选择和培养；3)愈伤的选择；4)愈伤的处理；5)愈伤的接种；6)丛芽的诱导；该工艺主要对组织培养中愈伤分化生芽过程中的培养基成分进行优化和改进，减少激素的使用量以及使用种类，使用单一激素成分，可以获得高繁殖系数，且芽长势旺盛，并适合后期培养。

主权项

丹参组织培养中愈伤分化生芽培养工艺，其特征在于，包括以下步骤：1)培养基的配制a、激素母液的配制：称取6‑BA 0.1g，用5mL 1M NaOH引溶，再用纯水定容至100mL，即为浓度为1.0mg/mL的6‑BA母液；b、激素抽滤灭菌：将滤膜放进抽滤头，高压灭菌，带进超净台，将IBA母液抽滤灭菌，备用；c、配制培养基基本成分：MS+30g/L蔗糖+5.26g/L琼脂，pH5.8；高压灭菌；带入超净台备用；d、添加激素：在超净台上用无菌的移液抢吸取6‑BA加入到基本培养基里，使其浓度为1.5mg/L，混匀；e、分装：将添加好激素的培养基分装到无菌的组培瓶中，每瓶30～40mL，成分为：MS+1.5mg/L 6‑BA+30g/L蔗糖+5.26g/L琼脂，pH5.8；2)外植体的选择和培养：以丹参叶片为外植体，消毒后，切成0.5*0.5cm大小置于愈伤培养基中培养；3)愈伤的选择：外植体诱导愈伤28‑30天，选择有光泽的愈伤；4)愈伤的处理；5)愈伤的接种；6)丛芽的诱导：接种后的愈伤放置于组培室的组培架上进行丛芽的诱导，培养条件：培养温度27±0.5℃，光照时间12h，光强3000Lx，T5植物培养灯管。