[发明专利]一种酶法提取铁皮石斛多糖的方法

摘要

本发明公开了一种酶法提取铁皮石斛多糖的方法，在温和的条件下，采用木瓜蛋白酶与中温α‑淀粉酶进行酶解，酶解液经过阴离子交换树脂脱色，真空浓缩，醇沉，冷冻干燥制得。本发明的技术效果是采用复合酶解的方法使多糖的转移率提高至大于87%，多糖中蛋白含量小于2%，除去淀粉杂质，条件温和，保持多糖的活性，同时避免毒性有机试剂的使用，操作方便，成本低，适于工业化生产。

主权项

1.一种酶法提取铁皮石斛多糖的方法，其特征在于：采用复合酶提取的方法显著提高铁皮石斛多糖的转移率，具体包括以下步骤：(1) 将干燥的铁皮石斛粉碎后过40～100目筛，得到铁皮石斛粉末；(2) 称取铁皮石斛粉末，加入15～30倍重量的纯化水，搅拌均匀，然后升温至40～60℃；(3) 向上述提取体系中分别加入木瓜蛋白酶、中温α‑淀粉酶，搅拌均匀，继续在40～60℃下酶解2～5h；(4) 将上述提取体系加热升温至90～100℃，并保温5～15min，使加入的酶制剂变性失活；(5) 待温度降至室温，2000～5000rpm 离心10～20min，上清液即为铁皮石斛石斛多糖提取液；(6) 上述铁皮石斛多糖提取液过阴离子交换树脂柱进行脱色；(7) 脱色后的铁皮石斛多糖提取液减压浓缩至每1mL相当于含生药0.1～1.0g的浓缩液；(8) 向上述浓缩液中加入95% 乙醇或无水乙醇，使乙醇浓度达到80%，在温度2～5℃下醇沉过夜；(9) 将上述乙醇沉淀液进行离心，沉淀物用80%乙醇洗涤3次，冷冻干燥至含水量小于5%，得到铁皮石斛多糖；(10) 采用苯酚‑硫酸法测定上述方法所得多糖的转移率，考马斯亮蓝法测定多糖中蛋白质的含量，双波长比色法测定淀粉含量，发现上述方法所得多糖转移率达87%以上，蛋白含量小于2%，未检出淀粉。