[发明专利]一种透性化细胞制备茶氨酸的方法在审
申请号: | 201710445408.3 | 申请日: | 2017-06-14 |
公开(公告)号: | CN107164418A | 公开(公告)日: | 2017-09-15 |
发明(设计)人: | 帅玉英;夏道宗;华颖 | 申请(专利权)人: | 浙江中医药大学 |
主分类号: | C12P13/04 | 分类号: | C12P13/04;C12N1/20;C12N11/10;C12N11/04;C12R1/38 |
代理公司: | 南通市永通专利事务所32100 | 代理人: | 葛雷 |
地址: | 310053 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种透性化细胞制备茶氨酸的方法,包括(1)制备透性化细胞首先将含胞内谷氨酰胺酶的菌株进行培养,培养好后离心,收集菌体;用pH9.0‑10.0的0.1 M硼砂缓冲液清洗菌体后,将菌体加入到处理试剂中进行处理,然后离心收集菌体;再用pH9.0‑10.0的0.1 M硼砂缓冲液清洗菌体,收集菌体,即得到透性化细胞;(2)透性化细胞转化法制备天然茶氨酸。本发明的有益效果方法简便,透性化细胞表观酶活力提高,表现出比游离酶更高的催化合成茶氨酸的活性。所得透性化细胞的酶活达可达到未渗透细胞的5‑10倍。透性化细胞可以重复使用,可显著降低生产成本。 | ||
搜索关键词: | 一种 透性化 细胞 制备 氨酸 方法 | ||
【主权项】:
一种透性化细胞制备茶氨酸的方法,其特征是:(1)制备透性化细胞:首先将含胞内谷氨酰胺酶的菌株进行培养,培养好后离心,收集菌体;用pH9.0‑10.0的0.1 M硼砂缓冲液清洗菌体后,将菌体加入到处理试剂中进行处理,然后离心收集菌体;再用pH9.0‑10.0的0.1 M硼砂缓冲液清洗菌体,收集菌体,即得到透性化细胞;(2)透性化细胞转化法制备天然茶氨酸:将步骤(1)得到的透性化细胞置于含0. 2~0. 4M谷氨酰胺和1.5~ 2.5M乙胺盐酸盐的pH 为9~10的50~100mM硼酸缓冲液中,在35~40℃下进行2~8小时的酶反应,制备得到茶氨酸。
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