[发明专利]一种淮阴苜蓿蛋白的提取方法

摘要

本发明公开了一种植物蛋白质的提取方法，具体涉及一种淮阴苜蓿蛋白沉淀、杂质分离和蛋白溶解，属于生物技术领域。该方法包括以淮阴苜蓿叶片为原料，在液氮预冷的研钵中快速研磨至粉末，研磨好的粉末转移到50mL离心管，加入预冷含0.07％巯基乙醇的8～12％TCA丙酮沉淀30～50min，用90‑100％的丙酮清晰三次，获得蛋白提取物，经裂解液溶解离心，上清液即为蛋白溶液。本方法在液氮中对样品进行研磨，有效的避免了研磨中高温对蛋白的破坏，蛋白质经过三氯乙酸丙酮充分沉淀并通过丙酮充分清洗，从而使蛋白质的提取更充分并减少了提取的蛋白质中的杂质含量，并且能有效获得各丰度蛋白，能节省提取时间和费用。

主权项

一种淮阴苜蓿蛋白的提取方法，是由‑20℃预冷的三氯乙酸的丙酮进行沉淀，用‑20℃预冷丙酮清洗三次，沉淀通过裂解液溶解。其特征在于，三氯乙酸的丙酮中三氯乙酸的含量为8‑10％；丙酮浓度为90‑100％；裂解液成分为7M尿素，2M硫脲，4％CHAPS，1％DTT，2％Ampholytes。