[发明专利]用于血液直接检测叶酸用药敏感型基因的试剂盒及其使用方法

摘要

本发明公开了本发明公开了一种用于血液直接检测叶酸用药敏感型基因的试剂盒及其使用方法，以人类血液为模板，分别加入检测MTHFR C677T和MTHFR A1298C多态性的对应特性引物和荧光探针，以及扩增核酸反应试剂中的血液高耐受taq聚合酶(Blood Resistance Taq)buffer和血液高耐受taq聚合酶，构成实时荧光定量PCR体系。经过Real time PCR反应，本领域技术人员通过荧光定量PCR仪所收集的数据确定MTHFR的基因型。具有不用进行核酸提取、快速省时、灵敏易判断、成本低廉等优点，适合临床的检测和推广。

主权项

一种用于血液直接检测叶酸用药敏感型基因的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液中含有下列组分：MTHFR A1298C和MTHFR C677T型多态性的对应特性引物和荧光探针，以及扩增核酸反应试剂中的血液高耐受taq聚合酶buffer和血液高耐受taq聚合酶，构成实时荧光定量PCR体系，所述MTHFRC677T引物包括：正向引物：MTHFRC677T‑F：5’‑GCACTTGAAGGAGAAGGTGTCT‑3’；反向引物：MTHFRC677T‑R：5’‑TGTGTCAGCCTCAAAGAAAAGCT‑3’；所述MTHFRA1298C引物包括：正向引物：MTHFRA1298C‑F：5’‑GGAGGAGCTGCTGAAGATGTG‑3’；反向引物：MTHFRA1298C‑R：5’‑CCCGAGAGGTAAAGAACAAAGACTT‑3’；所述MTHFRC677T探针包括：MTHFRC677T野生型探针：5’‑荧光基团‑ATGAAATCGGCTCCCGC‑MGB‑3’；MTHFRC677T突变型探针：5’‑荧光基团‑ATGAAATCGACTCCCGC‑MGB‑3’；所述MTHFRA1298C探针包括：MTHFRA1298C野生型探针：5’‑荧光基团‑CAAAGACACTTTCTTC‑MGB‑3’；MTHFRA1298C突变型探针：5’‑荧光基团‑AGACACTTGCTTCACT‑MGB‑3’。