[发明专利]一种野生白芨组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明提供一种野生白芨组织培养快速繁殖方法，涉及植物培育繁殖技术领域，本发明的野生白芨组织培养快速繁殖方法包括如下步骤(一)种子培养阶段、(二)移栽大田阶段；其中，种子培养阶段包括1)外植体的消毒、2)培养基的准备、3)播种、4)培养室培养和5)大棚炼苗；移栽大田阶段包括(1)整地、(2)播种、(3)施肥管理、(4)病虫害防治。本发明野生白芨组织培养快速繁殖方法从种子的培养到移栽大田后的培育，都进行严格把关，各个步骤紧密结合，相互作用，提高了野生白芨的成活率，适用于大规模种植。

主权项

一种野生白芨组织培养快速繁殖方法，其特征在于，具体包括如下步骤：(一)种子培养阶段1)外植体的消毒：首先用流水冲洗白芨蒴果26‑32min，再用洗衣粉水刷洗蒴果表面，接着用蒸馏水冲洗2‑3遍，然后置于超净工作台上先用75％酒精消毒2‑3min，再用3％的新洁灭浸泡3‑5min，期间不停的摇动，使其消毒彻底，然后放在无菌接种盘自然风干后用无菌手术刀切开一头备用；2)培养基的准备：以VW培养基为基础培养基，在每升基质中添加：土豆液55‑65g、6‑BA0.4‑0.6mg、蔗糖15‑25g、NAA 0.04‑0.06mg、琼脂3.5‑4.0g以及8‑12g纯净水，其制备方法是将上述原料混合搅拌均匀后，将PH值调节至5.6‑5.8，装入培养皿器，在120‑123℃高温下蒸汽灭菌15‑20分钟后进行冷却，得到培养基备用；3)播种：取经高温灭菌的培养皿器，在超净工作台里按照无菌操作的要求打开培养皿器口盖，用镊子夹取经步骤1)处理的白芨蒴果，将切开的一头对准培养皿器，将镊子伸进瓶口，用镊子尖后部在皿器口壁轻轻敲击，使种子均匀撒落培养基上，盖好培养皿器口，拿出超净工作台备用；4)培养室培养：对培养室内进行消毒后采用荧光灯进行光照，控制培养室温度为22‑28℃，湿度为60‑75％，光照度为1500‑1800Lux，25天开始萌发，45天后小苗过密并且培养皿器内营养耗尽，45天后更换培养皿器进行分瓶，每个培养皿器内放30‑35株小苗，分瓶后再经过45‑50天培养即可出瓶炼苗；5)大棚炼苗：用镊子将小苗从培养皿器中取出，用自来水将小苗根部的培养基洗净，然后种植到培养土苗盘里并喷淋定根水，待叶面干后，喷施800‑1000倍液的农用链霉毒，7‑15天后喷施20‑30倍的沼气液，在大棚内培育3‑5个月后进行移栽；(二)移栽大田阶段(1)播种：经大棚炼苗后，弃去黄化和发育不良的种苗，整理出健康种苗放入事先挖好的穴中，每穴放苗一株，放苗时使其根自然展开，覆土过根茎，同时保证枝干与主根的结合部分露出土外，覆土完成后将土压实，并浇灌定根水；(2)施肥管理：移栽大田2个月后进行初次施肥，初次施肥7‑10天后对叶面喷施营养液进行追肥；所用肥料为农家肥与生态肥按照比例为1‑3:2‑5混合，施肥时间为每年4‑8月份，每年施肥4‑6次，施肥结合中耕除草进行；每1‑2月用营养液进行叶面喷施一次；所述营养液是将20‑30重量份的腐殖土与10‑18重量份的草木灰混合后浸泡在60‑80重量份的水中，浸泡2天后将其过滤，取液体加入10‑15重量份的沼液混合搅拌均匀即可；所述农家肥为家禽粪便；所述生态肥通过将20‑40重量份的茶渣置于容器中，掺拌10‑20重量份的花生饼、10‑15重量份的稻壳和10‑20重量份的新鲜土质，再浇入10‑30重量份的水，然后进行堆沤，待茶渣、稻壳和花生饼腐烂后变成腐烂质土后得到的。