[发明专利]一种富油角毛藻的藻油高效提取方法

摘要

本发明公开了一种富油角毛藻的藻油高效提取方法，通过将角毛藻培养后得到的混合液离心、过滤收集，然后采用挤压膨化预处理得到膨化藻泥，进行酶解，干燥，然后采用超临界CO2进行破乳萃取，超滤膜过滤得到藻油。本发明的方法对角毛藻中含有藻油的部分进行多重提取，显著提高提取效率。所述的富油角毛藻的藻油高效提取方法在生物柴油生产方面具有非常重要的应用前景。

主权项

一种富油角毛藻的藻油高效提取方法，其特征在于，主要包括以下步骤：步骤一：角毛藻培养基制备：CO(NH2)2(尿素)10‑20mg，KH2PO4 5‑10mg，FeC6H5O7·5H2O 0.4‑0.8mg，EDTA 3‑5mg，Na2SiO3·9H2O 10‑12mg，NaHCO3 300‑500mg，九二0植物生长刺激素3‑5国际单位，VB1 0.1‑0.3mg，VB6 0.1‑0.3mg，VB12 0.05‑0.09mg，柠檬酸铁铵1‑2mg，ZnSO4 300‑500mg，体积比2‑4％的钼酸水溶液5‑15ml，硫酸锰5‑8mg，磷酸二氢钾5‑15mg，氯化钾3‑5mg，消毒后的海水1000mL，混合溶解后制备所述的培养基。步骤二：角毛藻的人工快速培养：选择角毛藻藻种，通过显微镜检查无其它异类杂藻、原生动物等，将角毛藻藻种接入装有培养基的培养容器中，接种密度为2‑3×105cell/mL，密封培养容器并开始充气培养，培养过程中进行光照，光线照度为3000‑4000lx；经过4‑6天的培养，密度达4×106‑5×106cell/mL即得到可用来提取藻油的角毛藻混合液。步骤三：藻油高效提取：将角毛藻混合液在转速为4000‑6000r/min的作用下离心10‑20min，过滤收集藻类物质，然后采用挤压膨化预处理得到膨化藻泥，将膨化物料与3‑5倍量的水混合得到混合液，向混合液中加入0.02倍体积的碱性蛋白酶进行酶解，酶解后离心分离得到游离油、乳状液、水解液和残渣，将乳状液调pH值为中性，干燥后水分含量为3‑5％，粉碎过筛80目，然后采用超临界CO2进行破乳萃取，然后采用0.22μm超滤膜过滤后，即得到藻油。