[发明专利]一种基于点击化学的铜离子检测方法及检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种基于点击化学的铜离子检测方法及检测试剂盒。二价铜离子在还原剂作用下被还原成一价铜离子，从而激活点击化学反应，连接两段核酸序列，磁珠分离后可进一步组装具有催化活性的催化型核酸结构，可切割底物核酸，从而使底物核酸两端的荧光基团和淬灭基团分离，通过荧光检测鉴定铜离子浓度。本发明具有较高的灵敏度，对铜离子的检测限为2 pM，检测具有很好的特异性，常见的其他干扰离子对检测不产生影响。检测过程操作简单，成本低廉，适用于实际样品中铜离子浓度的快速检测。

主权项

1.一种基于点击化学的铜离子检测试剂盒，其特征在于，包括还原剂、杂交缓冲液和下列核酸序列：核酸序列A：A的一端修饰叠氮基团，另一端修饰有基团并固定结合在修饰有对应基团的磁珠或者胶体金；核酸序列B：B的一端修饰炔基基团；核酸序列C：C的两端分别与A和B互补，形成A‑B‑C复合物，其中C与A和B完全互补，或C的两端与A和B互补，C中间不互补区域的碱基数不超过2个；A‑B‑C复合物中A修饰叠氮基团的一端靠近B修饰炔基基团的一端；核酸序列D：D的一端与A互补，另一端与F的部分互补，其序列为：GATATCAGCGATTAACACTCAGGATTCG；核酸序列E：E的一端与B互补，另一端与F的部分互补，其序列为：TAGGTATTTGTAGGTTACACCCATGTTACTCT；核酸序列F：包含有催化核酸的识别位点TrAG，识别位点两端分别有6个碱基与D和E的一端互补；F的两端分别修饰荧光基团和相应的淬灭基团。