[发明专利]一种戒烟灵中烟碱的手性分析高效液相色谱法

摘要

本发明公开了一种戒烟灵中烟碱的手性分析高效液相色谱法，其特征在于将戒烟灵样品干燥、粉碎和过筛，样品经过氢氧化钠溶液浸润后，采用甲基叔丁基醚和甲醇溶液萃取，萃取液经基质分散固相萃取净化后，使用手性柱‑正相液相色谱紫外检测器分析，采用峰面积归一化法定量检测戒烟灵中S‑(‑)‑烟碱和R‑(+)‑烟碱的比例。本方法提供的检测方法，样品萃取净化方法简单高效，可降低样品液对色谱柱的污染，液相检测方法灵敏度高，分析时间短，能够满足大批量戒烟灵样品中烟碱的手性分析。

主权项

一种戒烟灵中烟碱的手性分析高效液相色谱法，其特征在于：将戒烟灵样品干燥、粉碎和过筛，样品经过氢氧化钠溶液浸润后，采用甲基叔丁基醚和甲醇溶液萃取，萃取液经基质分散固相萃取净化后，使用手性柱‑正相液相色谱紫外检测器分析，采用峰面积归一化法定量检测戒烟灵中S‑(‑)‑烟碱和R‑(+)‑烟碱的比例，具体步骤如下：1). 标准溶液的配制：称取约100.0 mg的S‑(‑)‑烟碱标准品，用正己烷和甲醇溶液稀释定容到50 mL棕色容量瓶中，配制成浓度约为2.0 mg/mL的S‑(‑)‑烟碱标准储备液；称取约50.0 mg的R‑(+)‑烟碱标准品，用正己烷和甲醇溶液稀释定容到50 mL棕色容量瓶中，配制成浓度约为1.0 mg/mL的R‑(+)‑烟碱标准储备液；利用S‑(‑)‑烟碱标准储备液和R‑(+)‑烟碱标准储备液稀释，配制S‑(‑)‑烟碱和R‑(+)‑烟碱浓度分别为100 μg/mL和5 μg/mL的混合标准溶液，另外分别稀释得到100 μg/mL的S‑(‑)‑烟碱和R‑(+)‑烟碱标准溶液；2). 戒烟灵样品的混匀：将戒烟灵样品置于40 oC烘箱中，1小时后将戒烟灵取出，粉碎后过0.45毫米孔径标准筛；3). 戒烟灵样品的萃取：称取0.3 g已粉碎的样品于15mL具塞离心管中，加入2.0 mL 5% 的氢氧化钠溶液，涡旋1min混匀后静置10 min浸润样品，取10 mL甲基叔丁基醚/甲醇溶液到具塞离心管中，并于旋涡混合器上以4000 rpm速度振荡30 min；4). 萃取液的净化：取1.5 mL萃取上清液于2 mL内含有基质分散固相萃取材料的净化离心管中，于旋涡混合器上以4000 rpm振荡2 min，以10000 rpm离心1min，取上清液过0.45 μm有机相滤膜后进液相分析；5).正相高效液相色谱条件：分析柱为Chiralcel OD‑H液相色谱柱，柱长 250 mm ，内径4.6 mm ，固定相粒径5 µm；流动相为正己烷和甲醇溶液，流速1 mL/min；等度洗脱；柱温30 ℃；进样体积 10 μL；紫外检测器检测波长252 nm；分析时间15 min；采用对照标样与样品中烟碱色谱峰的保留时间进行S‑(‑)‑烟碱和R‑(+)‑烟碱的定性分析，对峰面积进行归一化定量S‑(‑)‑烟碱和R‑(+)‑烟碱占总烟碱的比例。