[发明专利]一种戒烟灵中烟碱的手性分析高效液相色谱法

权利要求书

1.一种戒烟灵中烟碱的手性分析高效液相色谱法，其特征在于：将戒烟灵样品干燥、粉碎和过筛，样品经过氢氧化钠溶液浸润后，采用甲基叔丁基醚和甲醇溶液萃取，萃取液经基质分散固相萃取净化后，使用手性柱-正相液相色谱紫外检测器分析，采用峰面积归一化法定量检测戒烟灵中S-(-)-烟碱和R-(+)-烟碱的比例，具体步骤如下：

1). 标准溶液的配制：称取约100.0 mg的S-(-)-烟碱标准品，用正己烷和甲醇溶液稀释定容到50 mL棕色容量瓶中，配制成浓度约为2.0 mg/mL的S-(-)-烟碱标准储备液；称取约50.0 mg的R-(+)-烟碱标准品，用正己烷和甲醇溶液稀释定容到50 mL棕色容量瓶中，配制成浓度约为1.0 mg/mL的R-(+)-烟碱标准储备液；利用S-(-)-烟碱标准储备液和R-(+)-烟碱标准储备液稀释，配制S-(-)-烟碱和R-(+)-烟碱浓度分别为100 μg/mL和5 μg/mL的混合标准溶液，另外分别稀释得到100 μg/mL的S-(-)-烟碱和R-(+)-烟碱标准溶液；

2). 戒烟灵样品的混匀：将戒烟灵样品置于40 ^oC烘箱中，1小时后将戒烟灵取出，粉碎后过0.45毫米孔径标准筛；

3). 戒烟灵样品的萃取：称取0.3 g已粉碎的样品于15mL具塞离心管中，加入2.0 mL 5% 的氢氧化钠溶液，涡旋1min混匀后静置10 min浸润样品，取10 mL甲基叔丁基醚/甲醇溶液到具塞离心管中，并于旋涡混合器上以4000 rpm速度振荡30 min；

4). 萃取液的净化：取1.5 mL萃取上清液于2 mL内含有基质分散固相萃取材料的净化离心管中，于旋涡混合器上以4000 rpm振荡2 min，以10000 rpm离心1min，取上清液过0.45 μm有机相滤膜后进液相分析；

5).正相高效液相色谱条件：分析柱为Chiralcel OD-H液相色谱柱，柱长 250 mm ，内径4.6 mm ，固定相粒径5 µm；流动相为正己烷和甲醇溶液，流速1 mL/min；等度洗脱；柱温30 ℃；进样体积 10 μL；紫外检测器检测波长252 nm；分析时间15 min；采用对照标样与样品中烟碱色谱峰的保留时间进行S-(-)-烟碱和R-(+)-烟碱的定性分析，对峰面积进行归一化定量S-(-)-烟碱和R-(+)-烟碱占总烟碱的比例。

2.根据权利要求1所述的戒烟灵中烟碱的手性分析高效液相色谱法，其特征在于：步骤3)中甲基叔丁基醚/甲醇的体积比90:10。

3.根据权利要求1所述的戒烟灵中烟碱的手性分析高效液相色谱法，其特征在于：步骤4)中所述的基质分散固相萃取材料含：150 mg无水硫酸镁，25 mg PSA吸附剂，7.5 mg GCB吸附剂。

4.根据权利要求1所述的戒烟灵中烟碱的手性分析高效液相色谱法，其特征在于：步骤5)中流动相正己烷和甲醇的体积比为98:2 。

5.根据权利要求1所述的戒烟灵中烟碱的手性分析高效液相色谱法，其特征在于：步骤1）中标准溶液配制时所用正己烷和甲醇溶液的体积比为98:2。