[发明专利]一种运送DNA的非病毒载体、制备方法及应用有效
申请号: | 201710135826.2 | 申请日: | 2017-03-08 |
公开(公告)号: | CN106868050B | 公开(公告)日: | 2020-06-26 |
发明(设计)人: | 陈志俊;李振华;丁晗 | 申请(专利权)人: | 吉林大学 |
主分类号: | C12N15/87 | 分类号: | C12N15/87 |
代理公司: | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人: | 潘宏伟 |
地址: | 130000 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明公开了一种运送DNA的非病毒载体的制备方法,包括将L‑色氨酸、牛血清蛋白、氯金酸和超纯水混合均匀,得到原料混合物溶液;将所述原料混合物溶液在室温下孵育,得到孵育混合物溶液;将孵育混合物溶液离心并收集上清液;将收集的上清液用透析袋透析,透析后的溶液经真空冷冻干燥,得到运送DNA的非病毒载体的。该非病毒载体具有较强的DNA结合力,良好生物相容性,有效地屏蔽了质粒的负电荷,从而成功被细胞内吞,具有较高转染效率,在对细胞无害的前提下,成功将外源基因输送到细胞内部并成功表达目的蛋白。 | ||
搜索关键词: | 一种 运送 dna 病毒 载体 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种运送DNA的非病毒载体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1,将L‑色氨酸、牛血清蛋白、氯金酸和超纯水按照30~35mg:200~220mg:0.5~2ml:7~9ml的比例混合均匀,得到原料混合物溶液;步骤2,将所述原料混合物溶液在室温下孵育8~10h,得到孵育混合物溶液;步骤3,将孵育混合物溶液以5000g离心5~10min,收集上清液;步骤4,将步骤3收集的上清液置于截留分子量为3500Da的透析袋内,加入超纯水,透析24h,然后将透析袋内的溶液经真空冷冻干燥,得到运送DNA的非病毒载体。
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