[发明专利]基于DNA产生电信号及其自组装放大信号的电化学适配体传感器测定HER2的方法

摘要

本发明公开了一种基于DNA产生电信号及其自组装放大信号的电化学适配体传感器测定HER2的方法，该方法是将HER2特异性多肽通过Au‑S键修饰在金电极表面用于捕获HER2，将HER2及HER2适配体以夹心形式固定在电极上后，利用HER2适配体上的引物端触发两条互补的单链DNA自组装成一条长的双链DNA结构，再利用钼酸钠与DNA骨架上的磷酸基团反应，生成磷钼酸盐沉淀产生电信号，且电信号的大小与电极表面DNA的量成正比的原理，实现人类表皮生长因子HER2的快速、准确、高灵敏度检测，该电化学适配体传感器成本低，且无需标记的，有利于推广应用。

主权项

1.基于DNA产生电信号及其自组装放大信号的电化学适配体传感器测定HER2的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)将金电极表面活化处理后，修饰HER2特异性多肽，再采用巯基己醇封闭；2)在所述金电极表面滴加HER2标准溶液，使HER2与其特异性多肽结合，再将HER2适配体修饰在电极上，形成夹心结构；再利用HER2适配体包含的小段DNA触发两条互补的单链DNA在所述金电极表面进行自组装形成双链DNA；再在所述金电极表面滴加Na₂MoO₄溶液进行反应，烘干，对金电极通过方波伏安法进行测试，得到峰电流值；3)取一系列不同浓度的HER2标准溶液，按步骤2)进行操作，得到与各浓度的HER2标准溶液相对应的峰电流值，建立HER2浓度与峰电流值的标准曲线；4)将HER2待测溶液替换步骤2)中的HER2标准溶液，按步骤2)进行操作，得到峰电流值，再根据标准曲线计算HER2待测溶液浓度；所述HER2适配体碱基序列为：GCAGCGGTGTGGGGTATCGTTAATTCGGTCG；所述两条互补单链DNA的碱基序列分别为：ATAGCAATTAAGCCAGCCAGGTTCGGTGCAT和GCTGGCT TAATTGCTATATGCACCGAACCTG。