[发明专利]一种提高濒危植物西藏大花黄牡丹成苗率及幼苗成活率的方法

摘要

一种提高濒危植物西藏大花黄牡丹成苗率及幼苗成活率的方法，本发明涉及提高西藏大花黄牡丹成苗率及幼苗成活率的方法。本发明为了解决濒危园艺植物西藏大花黄牡丹成苗率及幼苗成活率低、育苗时间长的问题。本发明步骤为：一：将采集到的大花黄牡丹的种子进行消毒；二：制备MS培养基母液；三：制备大花黄牡丹芽诱导培养基；四：剥去大花黄牡丹种子的种皮及胚乳，分离出种胚后，将其接种至大花黄牡丹芽诱导培养基表面；五：转至培养箱进行培养，得到无菌苗；六：制备生根培养基；七：将无菌苗接种到生根培养基中进行生根培养；八：将生根培养后的无菌苗进行驯化移栽。本发明应用于西藏濒危植物资源保护领域。

主权项

1.一种提高濒危植物西藏大花黄牡丹成苗率及幼苗成活率的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：将采集到的大花黄牡丹的种子进行消毒；步骤二：制备MS培养基母液；步骤三：制备大花黄牡丹芽诱导培养基；具体过程为：在步骤二制备的MS培养基母液中加入浓度为1mg/L的6‑BA，浓度为0.3mg/L的IAA，浓度为0.2mg/L的GA3；所述6‑BA为6‑苄基腺嘌呤，IAA为吲哚乙酸，GA3为赤霉素；步骤四：剥去步骤一消毒后的大花黄牡丹种子的种皮及胚乳，分离出种胚后，将种胚接种至步骤三制备的大花黄牡丹芽诱导培养基表面；步骤五：步骤四接种后转至培养箱进行培养，得到无菌苗；培养条件为：19℃、1500lx、14h光照培养后10h黑暗培养；步骤六：制备生根培养基；所述生根培养基为1/2MS中加入2g/L IBA和0.1‑0.2g/L NAA；所述IBA为吲哚丁酸，NAA为萘乙酸；步骤七：将步骤五得到的无菌苗接种到步骤六制备的生根培养基中进行生根培养；培养条件为：19℃、1000lx、14h光照培养后10h黑暗培养；步骤八：将步骤七生根培养后的无菌苗进行驯化移栽；所述步骤一中将采集到的大花黄牡丹的种子进行消毒的具体过程为：将采集的种子加入75％的乙醇，消毒30‑35s，无菌水冲洗1‑2次，加入0.1％的升汞，处理15min‑16min，无菌水冲洗2‑3次，加入60‑65mL无菌水浸泡2‑3天；所述步骤二中制备MS培养基母液的具体过程为：取100mL大量元素、10mL微量元素、10mL铁盐、10mL有机物，加入30g蔗糖，加蒸馏水定容至1L，调pH至6.0，加入7g琼脂粉，121℃、15min高压灭菌；所述步骤八中将步骤七生根培养后的无菌苗进行驯化移栽的具体过程为：无菌苗苗龄达到2‑3个月，幼苗高5‑5.5cm，打开培养瓶的瓶盖，炼苗一周，移栽到腐殖土中，在15‑18℃、避光、湿度为60％‑70％的环境中培养，13‑14天后，逐渐降低湿度至30％‑50％，长出新根或新叶后转至自然光照下培养。