[发明专利]一种α-2，3脱氨基唾液酸乳果糖制备方法

摘要

本发明公开了一种α‑2，3脱氨基唾液酸乳果糖的制备方法，其特征在于：甘露糖40～80重量份，丙酮酸钠100～200重量份，乳果糖50～100重量份，三磷酸胞苷钠(CTP)125～260重量份，溶于4000～8000重量份超纯水中，用4摩尔/升的NaOH调pH8.5，加入400～1000重量份1摩尔/升的pH8.5的Tris‑HCl；加入40～100重量份2摩尔/升的MgCl2；加入5～8重量份唾液酸醛缩酶，6～10重量份的CMP‑唾液酸转移酶；6～10重量份的α‑2，3唾液酸苷转移酶。然后在37℃气浴振荡器反应24小时。待乳果糖反应完全后，往反应液中加相同体积95％乙醇，放入4℃冰箱中静置30min，然后在7000转/分下离心30min，上清液采用旋转蒸发浓缩。采用生物胶柱纯化，旋转蒸发浓缩，并冷冻干燥即为纯品。

主权项

1.一种α‑2，3脱氨基唾液酸乳果糖制备方法，其特征在于：甘露糖40～80重量份，丙酮酸钠100～200重量份，乳果糖50～100重量份，三磷酸胞苷钠(CTP)125～260重量份，溶于4000～8000重量份超纯水中，用4摩尔/升的NaOH调pH8.5，加入400～1000重量份1摩尔/升的pH8.5的Tris‑HCl；加入40～100重量份2摩尔/升的MgCl2；加入5～8重量份唾液酸醛缩酶，6～10重量份的CMP‑唾液酸转移酶；6～10重量份的α‑2，3唾液酸苷转移酶。然后将混合物放入37℃气浴振荡器中，反应24小时。采用硅胶薄层层析(TLC)检测反应程度，TLC展开溶剂采用正丙醇∶甲醇∶水＝4∶2∶1。待乳果糖反应完全后，往反应液中加相同体积95％乙醇，混合均匀，放入4℃冰箱中静置30min，然后在7000转/分下离心30min，上清液采用旋转蒸发浓缩。浓缩液采用生物胶(Bio‑gel P‑2)层析柱纯化。收集纯化后的溶液，旋转蒸发浓缩，并冷冻干燥即为纯品，采用质谱利核磁共振鉴定纯品的分子量以及结构。