[发明专利]聚合酶组合物和套组以及其使用与制造方法

摘要

本公开提供适用于核酸聚合的组合物、方法、套组、系统以及设备。确切地说，提供允许核酸扩增的重组聚合酶和其生物活性片段。在一些方面中，本公开提供当在合成测序反应中使用时相比于对照聚合酶产生较低系统误差速率和/或改进的准确度的重组聚合酶。在一个方面中，本公开涉及适用于核酸测序、基因分型、拷贝数变异分析、双端测序和基因分析的其它形式的重组聚合酶。在另一个方面中，所述重组聚合酶适用于在PCR、emPCR、等温扩增、重组酶聚合酶扩增、滚环扩增、链置换扩增和邻位连接扩增期间扩增核酸模板。在一些方面中，本公开涉及适用于产生核酸库和/或核酸模板的重组聚合酶。

主权项

1.一种包含重组DNA聚合酶的组合物，其中所述重组DNA聚合酶包含与SEQ ID NO:1或其片段具有至少80％一致性的多肽链段，展现聚合酶活性，包括H46R、E446Q、H572R、H281M、D423K和N487R，且进一步包括(a)一个或多个选自由以下组成的群组的氨基酸取代：E30K、G209Q、E220H或E220T、P236I或P236R、E245R、L252R、S260K、D264K或D264M、E267M或E267K或E267R、E277T、T324R、E325R、A344Y、E442R或E442Y、E456R、H473G、D480L、N485R、A492K、E493G或E493R、M495C、N517C或N517K、E522C和H528T，其中编号相对于SEQ ID NO:1；或(b)两个或更多个选自以下的氨基酸取代：E30K、G209Q、E220H、E220K或E220T、N234K或N234R、P236I或P236R、V241K、E245R、V251R、L252R、S260K、D264K或D264M、E267M或E267K或E267R、E277T、E294K、T324R、E325R、A344Y、E442R或E442Y、E456R、H473G、D480L或D480R、N485R、A492K、E493G或E493R、M495C、N517C或N517K、E522C和H528T，其中编号相对于SEQ ID NO:1。