[发明专利]以高产量和滴度产生鼠李糖脂的半连续工艺

摘要

提供产生鼠李糖脂的微生物的半连续发酵方法以产生鼠李糖脂。发酵可以以分批工艺运行，但发酵结束时，取出至少约70％包含一种或多种鼠李糖脂的发酵培养基，并加入新培养基(原料)作为替代。此工艺可重复至少约1个月，而不用牺牲RL产量和滴度。相较于分批和补料分批发酵策略，这允许以更高生产力使用发酵罐而用于清洗的停机时间更少。

主权项

用于产生包含一种或多种鼠李糖脂的多个发酵产物的半连续方法，所述方法包括：(a)在培养基中培养产生鼠李糖脂的微生物，所述培养基包括至少一种碳源如葡萄糖、脂肪醇、脂肪酸或植物油如橄榄油、菜籽油、橄榄油、玉米油、葵花油、芥花油和大豆油；至少一种氮源如NaNO3、尿素和NH4Cl；至少一种磷源如H3PO4和K2HPO4；至少一种镁源如MgSO4*7H2O和MgCl2；至少一种钾源如KCl和KOH；至少一种硫源如H2SO4；至少一种氯源如KCl和NaCl及至少一种钠源如NaCl、NaNO3和NaOH，以及任选存在地，乳化剂如阿拉伯胶、瓜尔豆胶和鼠李糖脂，所述培养进行约2至约5天以获得包含鼠李糖脂的第一发酵培养基；(b)移出至少约70％的(a)中所获得的包含一种或多种鼠李糖脂的发酵培养基；(c)用具有步骤(a)中所示的组成的培养基取代(b)中所移出的所述包含一种或多种鼠李糖脂的发酵培养基；(d)重复步骤(a)‑(c)至少一次以获得包含鼠李糖脂的后续发酵产物，其中所述步骤(a)‑(c)能够重复至少约30天，且其中所述方法还包括，任选地，向步骤(a)的所述培养基加入(1)包含一种或多种微量营养素的组合物，所述微量营养素的浓度不超过20mg/L微量营养素溶液，所述组合物以每天0.1％v/v总发酵体积加入，和/或(2)止泡剂如碳基或硅基止泡剂。