[发明专利]一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法有效
| 申请号： | 201611123598.9 | 申请日： | 2016-12-08 |
| 公开（公告）号： | CN106771189B | 公开（公告）日： | 2018-08-10 |
| 发明（设计）人： | 刘自立;马贵军;石海芳;俞爱敏;姬明放 | 申请（专利权）人： | 申联生物医药（上海）股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569 |
| 代理公司： | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人： | 郭国中 |
| 地址： | 200241 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法，包括以下步骤：将口蹄疫合成肽疫苗破乳，将破乳后的抗原样品采用竞争ELISA方法进行定性定量检测；所述破乳方法为：将油佐剂疫苗与正丁醇混合，然后加入竞争剂混匀后，离心，即得抗原样品。该方法通过加入竞争剂与表面活性剂竞争抗原结合位点，将油佐剂疫苗中的抗原释放至水相中，大大提高了水相中的抗原回收率，使样品无需进行纯化处理即可测定，缩短了检测时间；本发明先将待检抗原与已知浓度的抗体先反应，抗体与抗原先完全中和；再随后将中和后的溶液与固相化吸附在ELISA板中的抗原反应，来测定待检抗原浓度，得到的标准曲线斜率会大于常规间接竞争法，从而大大提高了检测灵敏度。 | ||
| 搜索关键词： | 油佐剂疫苗 抗原 定量检测 破乳 定性 抗原样品 竞争剂 抗体 中和 标准曲线斜率 表面活性剂 检测灵敏度 竞争ELISA 纯化处理 间接竞争 结合位点 竞争抗原 抗原反应 固相化 合成肽 正丁醇 混匀 吸附 回收率 口蹄疫 疫苗 释放 检测 | ||
【主权项】：
1.一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：将口蹄疫合成肽疫苗破乳，将破乳后的抗原样品采用竞争ELISA方法进行定性定量检测；所述破乳方法为：将油佐剂疫苗与正丁醇混合，然后加入竞争剂混匀后，离心，即得抗原样品；所述竞争剂为组氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸中的一种；所述竞争剂的加入量为：每1ml油佐剂疫苗中加入1‑40mg竞争剂。
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