[发明专利]一种用于大肠杆菌电泳样品制备的方法在审
| 申请号： | 201611113311.4 | 申请日： | 2016-12-07 |
| 公开（公告）号： | CN106596222A | 公开（公告）日： | 2017-04-26 |
| 发明（设计）人： | 王群;邰建东;薛曌萍;刘昶;王超;李强;李莹;王欣;王玉莹;吕品;王美华 | 申请（专利权）人： | 长春长生生物科技有限责任公司 |
| 主分类号： | G01N1/28 | 分类号： | G01N1/28 |
| 代理公司： | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司22100 | 代理人： | 陈宏伟 |
| 地址： | 130011 *** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明提供一种用于大肠杆菌电泳样品制备的新的方法，对于高密度发酵培养的大肠杆菌发酵液，可以在处理样品时很好的实现大肠杆菌的裂解，有效降低粘度，确保样品移取的准确度，取得好的电泳检测结果。本发明制备的电泳通过考马斯亮蓝法染色和脱色，脱色结束后，将凝胶置于纯化水中，电泳条带清晰，色差明显，背景干净，无弥散带和杂带干扰。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 大肠杆菌 电泳 样品 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种制备大肠杆菌发酵液的电泳样品的方法，包括以下步骤：1）对应用生物反应器高密度培养的大肠杆菌发酵液，取1mL大肠杆菌发酵液，在3台式离心机上1000rpm离心1分钟，弃去上清液收获沉淀，加入1mLPBS缓冲液（重悬沉淀，1000rpm离心1 min，弃去上清液收获沉淀；加入1mL凝胶加样缓冲液重悬沉淀，37℃下静置孵育10min，1000rpm离心1 min，弃去上清液收获沉淀；向沉淀中加入200µL H2O重悬沉淀，加入洗涤液200µL，100℃沸水中煮沸5‑10min，1000rpm离心1 min，弃去沉淀收获上清液，从上清液中取10µL上样，进行电泳；2）在常规的电泳条件下，第一步在恒压80V下，电泳30min，第二步在恒压120V下，电泳120min，结束电泳，即得目标产物。
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