[发明专利]一种促进毛发再生的细胞营养液的制备方法

摘要

本发明提供一种促进毛发再生的细胞营养液的制备方法，主要包括三个步骤步骤1)ADSCs的原代分离；2)ADSCs的扩大培养；3)ADSCs的诱导培养。本发明制备的细胞营养液可以从细胞再生角度解决脱发问题，ADSCs条件培养液在毛囊周期性重建过程中，能激活毛囊干细胞微环境，调控毛囊正常生长；采用低剂量的UVB照射可以明显的增加ADSCs的存活、迁移、旁分泌能力，血管形成能力以及毛发再生能力；采用成纤维细胞的条件培养液培养ADSCs可以模拟在体环境下细胞的生存代谢过程，促进细胞分泌更多利于细胞微环境调控的细胞因子；同时该方法制备细胞营养液的细胞取材方便，可取材于临床抽脂后的脂肪废弃物及其他外科手术切除的皮片，来源广泛，便于临床推广。

主权项

一种促进毛发再生的细胞营养液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)ADSCs的原代分离将脂肪组织离心处理，去除液体部分，得固态的脂肪颗粒；然后将脂肪颗粒去除结缔组织，剪碎，加入生理盐水进行清洗，离心，去除液体部分，得固态的脂肪颗粒；再加入生理盐水配置的胶原酶溶液，震荡，收集消化液，离心，去除上清，取细胞沉淀；再加入生理盐水，离心，对细胞进行清洗，取细胞沉淀，用1‑10ml培养液重悬，接种于培养瓶中，置于恒温培养箱中进行培养；2)ADSCs的扩大培养将步骤1所得的原代脂肪细胞培养5‑7天后，弃去培养液，用PBS清洗一次，用胰酶消化后，进行1:2‑3传代培养，之后每48‑72h传代一次；3)ADSCs的诱导培养将步骤2中10代以内ADSCs接种于6孔板中，培养1‑2天，弃去培养液，用PBS清洗后，经过UVB照射和成纤维细胞条件培养液处理后，即得促进毛发再生的细胞营养液。