[发明专利]癃闭欣通颗粒的质量检测方法

摘要

本发明公开了一种治疗慢性前列腺炎中成药癃闭欣通颗粒的质量检测方法，所述质量检测方法以薄层色谱法鉴别制剂中肉桂、紫花地丁、玄参、黄柏、苦参、粉萆薢和川牛膝，同时采用HPLC测定制剂中黄柏的盐酸小檗碱含量和桃仁中的苦杏仁苷含量。本发明质量检测方法稳定可靠、专属性强、重现性好，能全面有效地控制癃闭欣通颗粒的质量，有利于稳定产品的质量，确保临床用药安全性和有效性，更好地满足医疗和市场的需要。

主权项

1.一种治疗慢性前列腺炎的中成药癃闭欣通颗粒的质量检测方法，其特征在于，该方法以薄层色谱法鉴别制剂中肉桂、紫花地丁、玄参、黄柏、苦参、粉萆薢和川牛膝，同时采用HPLC测定制剂中黄柏的盐酸小檗碱含量和桃仁中的苦杏仁苷含量；所述薄层色谱法鉴别制剂中肉桂包括以下步骤：1）供试品溶液的制备：取本品10g，研细，加甲醇50mL，超声提取30分钟，时加振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用稀盐酸调pH值至1‑2，用乙醚提取2次，每次20mL，合并乙醚液，低温挥干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为供试品溶液；2）对照品溶液的制备：取桂皮醛对照品加乙醇制成每1mL含1µL的溶液，作为对照品溶液；3）点样、展开：吸取供试品溶液2‑5µL，对照品溶液2µL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60‑90℃石油醚：乙酸乙酯=17：3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼乙醇试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；所述薄层色谱法鉴别制剂中紫花地丁包括以下步骤：1）供试品溶液的制备：取本品10g，研细，加甲醇50mL，超声提取30分钟，时加振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用稀盐酸调pH值至1‑2，用乙醚提取2次，每次20mL，合并乙醚液，低温挥干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为供试品溶液；2）对照药材溶液的制备：另取紫花地丁对照药材2g，加甲醇20mL，超声提取20分钟，滤过，蒸干，残渣加热水20mL使溶解，滤过，用稀盐酸调pH值至1‑2，用乙醚提取2次，每次20mL，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为对照药材溶液；3）点样、展开：吸取上述两种溶液各2‑5µL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷：丙酮：甲酸=25：20：4为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点；所述薄层色谱法鉴别制剂中玄参包括以下步骤：1）供试品溶液的制备：取本品10g，研细，加甲醇50mL，超声提取30分钟，时加振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用稀盐酸调pH值至1‑2，用乙醚提取2次，每次20mL，提取后的水液用乙酸乙酯提取3次，每次20mL，合并乙酸乙酯溶液，蒸干，残渣用少量50%甲醇溶解，加在100‑200目中性氧化铝柱上，用50%甲醇30mL洗脱，洗脱液蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液；2）对照品溶液的制备：取玄参对照药材1g，加甲醇20mL，超声提取30分钟，滤过，蒸干，残渣加水20mL使溶解，用乙酸乙酯提取2次，每次20mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为对照药材溶液；3）点样、展开：吸取供试品溶液5‑10µL，对照药材溶液4µL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷：甲醇：水：甲酸=12：4：1：1的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；所述薄层色谱法鉴别制剂中黄柏包括以下步骤：1）供试品溶液的制备：取本品10g，研细，加甲醇50mL，超声提取30分钟，时加振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用稀盐酸调pH值至1‑2，用乙醚提取2次，每次20mL，提取后的水液用乙酸乙酯提取3次，每次20mL，提取后的水液用氨试液调pH值至10‑11，用三氯甲烷20mL提取1次，三氯甲烷液蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为供试品溶液；2）对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；3）点样、展开：吸取上述两种溶液各1‑2µL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇：冰醋酸：水=7：1：2为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；所述薄层色谱法鉴别制剂中苦参包括以下步骤：1）供试品溶液的制备：取本品10g，研细，加甲醇50mL，超声提取30分钟，时加振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用稀盐酸调pH值至1‑2，用乙醚提取2次，每次20mL，提取后的水液用乙酸乙酯提取3次，每次20mL，提取后的水液用氨试液调pH值至10‑11，用三氯甲烷20mL提取1次，三氯甲烷液蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为供试品溶液；2）对照品溶液的制备：取苦参碱对照品，加甲醇制成每1mL含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；3）点样、展开：吸取供试品溶液2‑5µL，对照品溶液5µL，分别点于同一用硅胶G薄层板上，以三氯甲烷：甲醇：氨水=5：0.6：0.2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；所述薄层色谱法鉴别制剂中粉萆薢包括以下步骤：1）供试品溶液的制备：取本品10g，研细，加甲醇50mL，超声提取30分钟，时加振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用稀盐酸调pH值至1‑2，用乙醚提取2次，每次20mL，提取后的水液用乙酸乙酯提取3次，每次20mL，提取后的水液用氨试液调pH值至10‑11，用三氯甲烷20mL提取1次，取提取后的水液10mL，用乙酸乙酯提取2次，每次10mL，弃去乙酸乙酯液，水液用水饱和的正丁醇提取2次，每次10mL，合并正丁醇层，用氨试液20mL洗涤1次，弃去氨水层，正丁醇层水浴蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为供试品溶液；2）对照品溶液的制备：取粉萆薢对照药材0.5g，加水30mL，煮沸10分钟，放冷，滤过，滤液用水饱和的正丁醇提取2次，每次20mL，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为对照药材溶液；3）点样、展开：吸取上述两种溶液各5µL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷：甲醇：水=13：7：2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点；所述薄层色谱法鉴别制剂中川牛膝包括以下步骤：1）供试品溶液的制备：取本品16g，研细，加甲醇50mL超声处理30分钟，时加振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用乙醚提取两次，每次30mL，弃去乙醚液，水液用稀盐酸调pH值至1‑2，用乙酸乙酯提取两次，每次20mL，乙酸乙酯液蒸干，残渣用甲醇：乙酸乙酯=1：1适量溶解，加于100‑200目中性氧化铝柱上，用甲醇：乙酸乙酯=1：1的溶液40mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液；2）对照品溶液的制备：另取川牛膝对照药材2g，加甲醇50mL，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用乙醚提取两次，每次30mL，弃去乙醚液，水液用稀盐酸调pH值至1‑2，用乙酸乙酯提取两次，每次20mL，乙酸乙酯液蒸干，残渣用甲醇：乙酸乙酯=1：1适量溶解，加于100‑200目中性氧化铝柱上，用甲醇：乙酸乙酯=1：1的溶液40mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为对照品溶液；3）点样、展开：吸取上述两种溶液各5µL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷：甲醇：甲酸=10：1.5：2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；所述高效液相色谱法测定制剂中黄柏的小檗碱含量包括以下步骤：1）供试品溶液的制备：取癃闭欣通颗粒适量，研细，取2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入盐酸：甲醇=1：100的溶液50mL，称定重量，超声处理30分钟，放冷，称定重量，用盐酸：甲醇=1：100溶液补足减失重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液3mL，加在100‑200目中性氧化铝柱上，用甲醇50mL洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解并定容于10mL容量瓶中，摇匀，滤过，即得；2）对照品溶液的制备：称取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.03mg的溶液，摇匀，即得；3）HPLC色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈：0.05mol/L磷酸二氢钠溶液=30：70为流动相；检测波长为346nm，理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于4000；4）测定方法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10uL，注入高效液相色谱仪，按照步骤3）所述色谱条件测定，即得；所述高效液相色谱法测定制剂中桃仁的苦杏仁苷含量包括以下步骤：1）供试品溶液的制备：取癃闭欣通颗粒适量，研细，取5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入水50mL，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，离心，精密吸取上清液10mL置分液漏斗中，用乙酸乙酯提取2次，每次20mL，弃去乙酸乙酯液，水液置蒸发皿中，用少量水洗涤分液漏斗，一并合并于蒸发皿中，水浴挥至无乙酸乙酯味，放冷，转移至25mL量瓶中，定容，摇匀，即得；2）对照品溶液的制备：称取苦杏仁苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液，摇匀，即得；3）HPLC色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇：水=18：82为流动相；检测波长为210nm，理论板数按苦杏仁苷计算应不低于4000；4）测定方法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液5uL，注入高效液相色谱仪，按照步骤3）所述色谱条件测定，即得。