[发明专利]一种提高米曲霉L-苹果酸合成过程中碳源利用率的方法在审
| 申请号： | 201610603079.6 | 申请日： | 2016-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN105969790A | 公开（公告）日： | 2016-09-28 |
| 发明（设计）人： | 刘龙;陈坚;刘晶晶;堵国成;李江华;房峻 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/80 | 分类号： | C12N15/80;C12N1/15;C12P7/46;C12R1/69 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 耿晓岳 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提高米曲霉L‑苹果酸合成过程中碳源利用率的方法，属于遗传工程领域。本发明以Aspergillus oryzae NRRL 3488作为出发菌株，首先通过过表达米曲霉细胞质内丙酮酸羧化酶和苹果酸脱氢酶，强化了从草酰乙酸合成苹果酸的代谢流，L‑苹果酸的摇瓶产量提高至50.5±1.06g/L，提高了38.4％。再在转化子Aspergillus oryzae p16中通过表达了大肠杆菌的丙酮酸羧化酶和丙酮酸羧化激酶，加强了米曲霉胞质内磷酸烯醇式丙酮酸到草酰乙酸的合成效率，最终L‑苹果酸的产量达到了63.2±1.32g/L，琥珀酸浓度为8.88±0.45g/L，生产强度也由初始Aspergillus oryzae NRRL 3488的0.24g/(L·h)提高至0.7g/(L·h)，为进一步代谢工程改造米曲霉生产L‑苹果酸奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 曲霉 苹果酸 合成 过程 碳源 利用率 方法 | ||
【主权项】：
一种能够提高米曲霉合成L‑苹果酸的过程中葡萄糖转化率的的方法，其特征在于，所述方法是在初始米曲霉菌株中过表达米曲霉来源的苹果酸脱氢酶mdh和丙酮酸羧化酶pyc，并同时表达来源于大肠杆菌的磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶pck和/或磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶ppc基因。
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