[发明专利]一种同时去除植物组织培养时外植体表面和内生菌的方法有效
| 申请号： | 201610576607.3 | 申请日： | 2016-07-20 |
| 公开（公告）号： | CN106171997B | 公开（公告）日： | 2018-11-06 |
| 发明（设计）人： | 苏晓华;张冰玉;丁昌俊;褚延广 | 申请（专利权）人： | 中国林业科学研究院林业研究所 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00;A01G9/029;A01N47/44;A01N43/90;A01P1/00 |
| 代理公司： | 北京中政联科专利代理事务所(普通合伙) 11489 | 代理人： | 陈超 |
| 地址： | 100091 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，尤其是植物组织培养技术领域，公开了一种同时去除植物组织培养时外植体表面和内生菌的方法。本发明采用50％的多菌灵对扦插土壤进行消毒处理，采用含有200mg/L两性霉素B和100mg/L硫酸链霉素的无菌水溶液对扦插枝条进行消毒处理，采用含有100mg/L两性霉素B和50mg/L硫酸链霉素的无菌水溶液对半木质化的新发枝条进行预处理，并且采用溶脂混合液对外植体进行预处理，从而能够有效清除杨树等外植体表面及内部的细菌及真菌，使外植体保持充足的活力。 | ||
| 搜索关键词： | 外植体 预处理 植物组织培养 硫酸链霉素 无菌水溶液 两性霉素B 内生菌 植体 去除 消毒 植物组织培养技术 生物技术领域 扦插土壤 扦插枝条 多菌灵 混合液 木质化 真菌 枝条 溶脂 细菌 杨树 | ||
【主权项】：
1.一种同时去除欧美杨组织培养时外植体表面和内生菌的方法，其包括以下步骤：(1)扦插土壤的消毒处理：采用50％的多菌灵对扦插土壤进行消毒处理；(2)扦插枝条的消毒处理：采用含有200mg/L两性霉素B和100mg/L硫酸链霉素的无菌水溶液对扦插枝条进行消毒处理，处理后，对扦插枝条进行顶端封腊处理；(3)外植体的选择和消毒预处理：采用含有100mg/L两性霉素B和50mg/L硫酸链霉素的无菌水溶液对半木质化的新发枝条进行预处理；(4)外植体的溶脂混合液预处理：采用溶脂混合液对外植体进行预处理5‑6分钟；(5)外植体的表面灭菌：①外植体的酒精灭菌处理；②外植体的次氯酸钠灭菌处理；③无菌水冲洗；(6)外植体的接种；(7)外植体的培养；其中所述溶脂混合液为0.1％的吐温20和10％的乙酸乙酯的水溶液。
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