[发明专利]一种快速区分AIV、NDV、MG和MS的多重荧光免疫分析方法及试剂

摘要

本发明公开了一种快速区分禽流感病毒、鸡新城疫病毒、鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的多重荧光免疫分析方法及试剂。本发明操作简单，通过PCR获得目标扩增片段，然后将扩增产物、荧光编码微球和链霉亲和素‑藻红蛋白进行杂交，然后通过检测仪读取MFI值，分辩不同类型的病原。本发明方法，能够同时对禽流感病毒、鸡新城疫病毒、鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体进行准确检测，而且特异性强，灵敏度高，重复性好。与传统检测方法相比，本发明方法实现了对同一样本中的多种不同目的分子同时进行检测，样本用量少，操作简单、快速，可大大降低检测成本。本发明的灵活性好，可以根据需要在此基础上加减检测病原的种类。

主权项

一种快速区分AIV、NDV、MG和MS的多重荧光免疫分析的引物，所述引物核苷酸序列如下所示：引物A1：5’‑ATGAGTCTTCTACCCGAGG‑3’(SEQ ID NO:1)，引物A2：5’‑TCAGAGGTGACAGGATTG‑3’(SEQ ID NO:2)；引物N1：5’‑CTCATCTCAGACAGGGTCAATC‑3’(SEQ ID NO:3)，引物N2：5’‑ATGGAGTCACCAAGGGG‑3’(SEQ ID NO:4)；引物G1：5’‑CTTACAGATTACAGGAGCAG‑3’(SEQ ID NO:5)，引物G2：5’‑AAGCATTTCATTTGTTTTAC‑3’(SEQ ID NO:6)；引物S1：5’‑ATTAGCAGCTAGTGCAGTGG‑3’(SEQ ID NO:7)，引物S2：5’‑TTTGAGGATTATCAGTATTTG‑3’(SEQ ID NO:8)；所述引物A1和A2、N1和N2、G1和G2、S1和S2这4组引物对中连接的tag序列选自SEQ ID NO:9～12所示的tag序列，且该4组引物对中连接的tag序列互不相同。