[发明专利]一种一体式T细胞培养提取方法

摘要

本发明涉及一种一体式T细胞培养提取方法，将血液标本输入至容器内，磁珠颗粒的抗体与血液标本中的T细胞发生反应，完成T细胞的分离；将血液标本中未与磁珠颗粒反应结合的细胞经容器流出至废液袋，同时往容器中输入生理盐水进行冲洗；冲洗结束后，将培养液输入至容器中，磁珠颗粒上吸附的T细胞在容器中进行培养；T细胞在容器中扩增，将病毒转染液输入至容器内，进行T细胞的转染；转染后的T细胞在容器中进行后续扩增至特定数量；然后将T细胞从磁珠颗粒表面洗脱，输入至一含有生理盐水的输液袋中供临床使用，使得病人与病人之间的细胞在同一个空间之内互相之间没有机会接触和产生可能的交叉污染。

主权项

一种一体式T细胞培养提取方法，其特征在于，将血液标本输入至一密闭的容器中，所述容器容置于一密闭的37℃的保温箱内，在所述容器中依次完成T细胞的分离、培养、扩增、转染、后续扩增和提取，包括以下步骤：步骤S1：将血液标本经容器顶部的入口输入至容器内，容器内容置有若干个磁珠颗粒，每个磁珠颗粒上附着有用于与血液标本中T细胞或自然杀伤T细胞结合的抗体，所述抗体与血液标本中的T细胞发生反应，进行充分结合，完成T细胞的分离；步骤S2：通过一电磁铁将磁珠颗粒吸附聚集于容器内侧壁上，将血液标本中未与磁珠颗粒反应结合的细胞经容器底部的出口流出至废液袋，同时往容器中输入生理盐水进行冲洗；步骤S3：冲洗结束后，关闭容器的出口，将培养液和含有空气和CO2的混合气体输入至容器中，同时电磁铁断电，磁珠颗粒上吸附的T细胞在容器中进行培养，计算此时T细胞的数量为N，N为正整数，且大于0；步骤S4：在培养液的作用下，T细胞在容器中扩增，待T细胞的数量大于5N时，将病毒转染液输入至容器内，进行T细胞的转染；步骤S5：转染后的T细胞在容器中进行后续扩增至特定数量；步骤S6：打开容器的出口，容器中的培养液流出至一废液袋中；步骤S7：将生理盐水输入至容器内，加力将T细胞从磁珠颗粒表面洗脱，将T细胞提取输入至一含有生理盐水的输液袋中供临床使用。